[发明专利]检测血酒精浓度的一次性生物传感器

摘要

本发明提供了一种检测血酒精浓度的一次性生物传感器，其制备方法以银薄层作导电基质，采用丝网印刷技术，在塑料薄膜上一次性丝网印刷商品碳墨作为工作电极，印刷Ag/AgCl墨作为对电极及参比电极，然后准确滴涂乙醇脱氢酶分析液于工作电极和参比电极之间的反应腔内，使其自然干燥，待电极片干燥后，用双面胶将透明胶粘到电极片上，在透明胶与塑料膜之间形成一个小电解池，当酶电极浸入待检血样时两者发生反应，在电场作用下产生电子转移并形成电流，根据所得电化学信号与待测底物的浓度之间的对应关系便可检测血酒精浓度。该生物传感器灵敏度高、准确度高，操作方便、快速，制备方法取材容易，操作简单，成本低，一次性使用，可成批生产。

主权项

1.一种检测血酒精浓度的一次性生物传感器，其制备方法包括以下步骤：(1)、镀银薄片电极的制备 选取光滑、平整的塑料薄膜，剪成长条形，将塑料薄膜片置于8～12％NaOH溶液中，加热2～5分钟，取出，用去离子水洗涤，晾干备用；在备用薄膜片正面覆盖一层保护膜，预留出工作电极和参比电极及其引出导线的形状大小尺寸，背面用保护膜完全覆盖，将该薄膜片置于体积比例是1∶1的1～3％葡萄糖和1～3％银氨溶液中，混匀，在室温下静置15～20分钟，待薄膜片上形成致密的银镜，将薄膜片取出，用去离子水洗涤晾干，撕去保护膜，即得所需镀银薄片电极；其中所述保护膜是塑料薄膜；(2)、基础电极的印刷 采用丝网印刷技术按以下形状和尺寸印刷：工作电极和参比电极形状均为条型，长度是30～50mm，宽度是1～3mm，两者之间的距离是1～2mm，碳墨经丝网印刷在步骤(1)制得的镀银薄片工作电极上，将银墨平行印刷在工作电极旁边的参比电极上，最后将氯化银墨印刷在参比电极上，每印完一次后，待自然干燥后再印下一次；(3)、固定乙醇脱氢酶分析液 取一块步骤(2)印好的电极片，将带电极孔的绝缘层粘附在电极片上，构成一个反应腔，然后将10～25微升的乙醇脱氢酶分析液，滴涂于工作电极与参比电极之间的反应腔内，待电极片自然干燥后，用双面胶将透明胶粘到电极片上；其中所述乙醇脱氢酶分析液是用pH值7～9的磷酸盐缓冲液稀释成浓度分别为乙醇脱氢酶10mg/mL、烟酰胺腺嘌呤二核甘酸5mmol/L、硫酸吩嗪二甲酯1mmol/L、铁氰化钾15mmol/L，并按体积配比关系乙醇脱氢酶∶烟酰胺腺嘌呤二核甘酸∶硫酸吩嗪二甲酯∶铁氰化钾2.8～3.2∶0.4～0.7∶1～1.5∶0.06～0.1混合摇匀配制而成；其中所述磷酸盐缓冲液是取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml制得；(4)、将双面胶剪成与酶层的电极片相匹配的大小贴在有酶层的电极片上，最后将透明胶贴在该双面胶上，这样就制成了一次性血乙醇脱氢酶电极。