[发明专利]一种黄芪药材的质量检测方法

摘要

本发明公开一种黄芪药材及其提取物的指纹图谱质量检测方法。该方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈－水为流动相，进行梯度洗脱；取黄芪甲苷加甲醇溶解，作为参照品溶液；取黄芪药材粉碎，以甲醇为提取溶剂，回流提取，回收甲醇至干，残渣用水溶解，在以水饱和的正丁醇为提取溶剂，以氨试液除杂，待水饱和的正丁醇提取物挥干后，在残留物中加入甲醇溶解，取甲醇溶解作为黄芪药材指纹图谱检测供试液或取黄芪皂苷，加甲醇溶解，作为黄芪皂苷指纹图谱检测供试液；供试液指纹图谱检测，用高效液相色谱对黄芪药材指纹图谱检测供试液进行检测，得黄芪药材及其黄芪皂苷的指纹图谱；供试品指纹图谱应与标准指纹图谱有良好的相似性，相似度＞0.90。

主权项

1、一种黄芪药材指纹的图谱质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈—水比例为0.1～0.5∶1作为流动相，进行梯度洗脱：0至20分钟，乙腈浓度为10～30％，继后15分钟，乙腈浓度从10～30％至30～40％，30～40％乙腈浓度维持至60分钟；流速0.5～1.0ml/min；柱温20～40℃；检测器为蒸发光散射检测器，漂移管温度95～125℃，气体流速2.5～3.2SLPM；参照品溶液的制备，精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作为参照品溶液；供试品溶液的制备，取黄芪药材适量，粉碎，取1.5g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇50～200ml，回流2～8小时，放冷，滤过，滤液回收甲醇至干，残渣加水20ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2～5次，每次10～40ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取1～4次，每次5～30ml，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液作为黄芪药材指纹图谱检测供试液；供试液指纹图谱检测，用高效液相色谱对黄芪药材指纹图谱检测供试液进行检测，进样量为5～50μl，记录60分钟的色谱图，得黄芪药材的指纹图谱；供试品指纹图谱应与标准指纹图谱相似度应大于0.90；黄芪药材指纹图谱共有7个共有指纹峰，参照峰S为黄芪甲苷色谱峰，7个共有指纹峰的相对保留时间分别为：1号峰0.387±0.039，2号峰0.802±0.080，3号峰0.852±0.085，4号峰0.875±0.088，5号峰0.909±0.091，S峰1.000±0.000，6号峰1.030±0.010。