[发明专利]棉花叶柄组织培养与高分化率材料选育方法

摘要

本发明公开了一种棉花的组织培养方法及其应用。其目的是提供一种棉花的组织培养方法及其在筛选高分化率棉花株系中的应用。培养方法包括以下步骤：(1)以经灭菌的叶柄为外植体，将其置于愈伤组织诱导培养基上诱导愈伤组织；(2)将愈伤组织置于分化培养基上进行分化培养；(3)将分化出的胚性愈伤组织在胚状体萌发成苗培养基上培养获得再生植株。该培养方法以叶柄为外植体，不仅分化率高，而且可用于高分化率棉花株系的筛选，筛选方法简单、周期短，可以进行推广应用。此外，筛选到的高分化率棉花还可以大幅度提高农杆菌介导法的转化效率，缩短转化周期。本发明将在棉花的组培、选育及其品种改良中发挥重要作用。

主权项

1、一种棉花的组织培养方法，包括以下步骤：(1)以经灭菌的大田成熟叶柄为外植体，将其置于愈伤组织诱导培养基上诱导愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基是在由MS培养基的无机盐配方和B5培养基的维生素配方组成的MSB基本培养基的基础上添加了吲哚乙酸0.05-0.15mg/L，激动素0.05-0.15mg/L，2，4-D 0.05-0.15mg/L，葡萄糖25-35g/L，凝胶剂1.5-2.5mg/L，pH5.6-6.0；(2)将愈伤组织置于分化培养基上进行分化培养；所述分化培养基是在MSB基本培养基的基础上添加了吲哚乙酸0.001-0.05mg/L，激动素0.001-0.05mg/L，葡萄糖25-35g/L，凝胶剂1.5-2.5mg/L，pH6.5-7.0；(3)将分化出的胚性愈伤组织置于胚状体萌发成苗培养基上进行再生成苗培养；所述胚状体萌发成苗培养基是在MSB基本培养基的基础上添加了激动素0.001-0.05mg/L，6-BA 0.005-0.1mg/L，蔗糖25-35g/L，凝胶剂1.5-2.5mg/L，pH6.5-7.0。