[发明专利]从胸、腹水中提取游离mRNA的方法无效
| 申请号： | 200610096455.3 | 申请日： | 2006-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN1952176A | 公开（公告）日： | 2007-04-25 |
| 发明（设计）人： | 刘宝瑞;王立峰;钱晓萍 | 申请（专利权）人： | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C07H21/02 |
| 代理公司： | 南京中新达专利代理有限公司 | 代理人： | 孙鸥 |
| 地址： | 210008*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种从胸、腹水中提取游离mRNA的方法。本发明将胸或腹水注入有枸橼酸钠溶液的无RNA酶抗凝管中，离心，吸取上清，再离心，再吸取上清，上清加入到Trizol LS溶液中，室温震荡，加入氯仿，剧烈震荡后室温下放置，离心，吸取水相层至新管，加入异丙醇，沉淀RNA，离心，75％乙醇洗涤后晾干，加入无RNA酶水，溶解RNA，以其为模板，常规技术反转录为cDNA保存。解决了过去无法从胸、腹水中抽提RNA的缺陷，可以对肿瘤及其他疾病进行早期诊治。操作方便，重复性强。 | ||
| 搜索关键词： | 腹水 提取 游离 mrna 方法 | ||
【主权项】：
1.从胸、腹水中提取游离mRNA的方法，其步骤在于：(1)将胸水或腹水注入有枸橼酸钠溶液的无RNA酶抗凝管中；(2)上离心机离心，吸取上清至新管，再离心，吸取三分之二上清至新管；(3)取上清加入到Trizol LS溶液中，室温震荡；(4)向其中加入氯仿，剧烈震荡后室温下放置；(5)上离心机离心，吸取水相层至新管；(6)加入异丙醇，沉淀RNA；(7)上离心机离心，75％乙醇洗涤后晾干；(8)加入无RNA酶水，溶解RNA，以其为模板，常规技术反转录为cDNA保存。
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