[发明专利]一种快速提取抗胃泌素释放肽肿瘤疫苗的制备工艺

摘要

本发明属于医药生物技术领域，公开了一种快速高效地从大肠杆菌中提取抗胃泌素释放肽肿瘤疫苗的制备工艺。将表达目的蛋白的重组工程菌裂解以后，用一步硫酸铵沉淀法从裂解上清液中获得了高纯度的目的蛋白，既避免了蛋白在多步纯化过程中的降解，又极大的简化了制备过程，节约了生产成本。

主权项

1.一种快速提取抗胃泌素释放肽肿瘤疫苗的制备工艺，其特征在于：1)将表达目的蛋白的重组工程菌悬浮于菌体裂解液(pH8.0，50mM Tris-HCl，0.02％溶菌酶)中，室温搅拌至菌体完全裂解后加入核糖核酸酶I，继续搅拌至溶液不再粘稠；2)将溶液冷冻离心，转速12000rpm，25分钟；3)收集离心后的上清液，在搅拌的条件下缓慢加入一定的硫酸铵粉末，然后将该溶液在冰水混合物中静置30分钟；4)将溶液冷冻离心，转速12000rpm，25分钟；5)将离心所得沉淀溶解于蒸馏水，装入透析袋中，置于大量蒸馏水中透析24小时，每8小时换一次蒸馏水；6)透析去盐后的蛋白溶液冷冻干燥，即得纯化的蛋白样品。