[发明专利]菲律宾蛤仔组织细胞培养方法

摘要

本发明涉及贝类组织细胞培养技术，具体地说是菲律宾蛤仔组织细胞培养方法，其特征在于包括以下步骤：(1)组织块的消毒灭菌处理：先用无菌过滤海水冲净组织块表面的粘液，再将组织块置于消毒液中浸泡消毒；(2)接种：将组织块均匀排布在涂有贴壁物质的培养瓶内壁上，在26℃～27℃恒温下预培养4～6小时，使接种的组织块贴壁牢固；(3)培养：添加培养液，在恒温培养箱中封闭培养，培养条件为温度26℃～27℃，pH7.2～7.4。本发明对组织块的消毒灭菌效果好，既可有效地杀灭组织表面的菌类，又可避免对组织的损伤，最大限度地保持组织活力，从而使组织块贴壁生长良好，细胞增殖速度快，并且操作简便易行。

主权项

1.一种菲律宾蛤仔组织细胞的培养方法，其特征在于包括如下步骤：(1)组织块的消毒灭菌处理：用解剖器具剪取适量的菲律宾蛤仔组织，用无菌过滤海水冲净组织块表面的粘液，将冲洗好的组织块置于消毒液中浸泡消毒，再用Hank’s平衡盐溶液反复冲洗组织块，以去除多余的消毒液。(2)接种：将组织块剪成1mm3左右的小块，均匀排布在涂有贴壁物质的细胞培养瓶底部内壁上，组织块的接种密度约为1小块/cm2。翻转培养瓶使贴有组织块一面的朝上，在培养瓶中加入少量培养液，不要使培养液与组织块接触，旋紧瓶塞后置于26℃～27℃恒温培养箱中预培养4～6小时，使接种的组织块贴壁牢固。(3)培养：组织块牢固贴壁后，将培养瓶翻正，添加适量培养液使其浸泡组织块，置于恒温培养箱中封闭培养，培养条件为温度26℃～27℃，pH 7.2～7.4，每隔2～3天更换一次培养液。