[发明专利]一种携人分子佐剂的融合蛋白避孕疫苗及其制备方法

摘要

本发明属生物制药领域，涉及一种与人分子佐剂hC3d3交联的避孕疫苗，即hCGβ－hC3d3融合蛋白避孕疫苗。本发明选用真核表达载体pCI，构建带有纯化标签的hCGβ－hC3d3融合蛋白和hCGβ蛋白的真核表达质粒，通过动物宿主获得高效表达，经鉴定、纯化得高纯度目的蛋白，通过体外刺激人PBMC实验，证实人分子佐剂hC3d3增强hCGβ蛋白疫苗体液免疫效力和抗生育潜能。较现有技术，其抗生育效果及其作用机理将更为合理、安全。

主权项

1.一种携人分子佐剂的融合蛋白避孕疫苗，其特征在于含有与人分子佐剂C3d3交联的hCGβ-hC3d3融合蛋白，通过下述方法制备：选用真核表达载体pCI，构建带有纯化标签的hCGβ-hC3d3融合蛋白和hCGβ蛋白的真核表达质粒，通过动物宿主表达系统获得高效表达，经鉴定、纯化得高纯度目的蛋白，包括下述步骤：1)hC3d基因克隆及构建重组pCI-gs-signal-6His-hCGβ、pCI-gs-signal-6His-hCGβ-hC3d3真核表达质粒；2)表达，鉴定、纯化目的蛋白融合蛋白hCGβ-hC3d3；3)hCGβ-C3d3促进B细胞表达CD86及CD80分子；4)hCGβ-C3d3促进共培养的PBMC、B+T细胞CD86、CD80、CD154、CD25分子表达；5)hCGβ-C3d3促进共培养的PBMC、B+T细胞分泌IL-2。