[发明专利]沙田柚HPLC指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱

摘要

本发明涉及沙田柚〔Citrus grandis(L.) Osbeckvar.shatinyu Hort.〕HPLC指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱。首先，取沙田柚样品粉末，用水煎煮，滤过，浓缩，加乙醇静置，取上清液作为供试品溶液。进行HPLC分析：精密吸取供试品溶液进样，色谱柱为Merck Lichrospher RP－18e(5μm，250×4.0mm)；线性梯度洗脱方式：0min→50min，甲醇：30％→60％，36％醋酸水混合液：70％→40％；；检测波长：320nm；得到沙田柚HPLC指纹图谱。对18批沙田柚样品HPLC指纹图谱比较，确定其共有指纹特征，得到沙田柚的标准指纹图谱。利用指纹图谱可有效地监控沙田柚的质量，保证其质量的稳定、均一、可控。

主权项

1.一种沙田柚HPLC指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：精密称取沙田柚样品粉末(过40目筛)1.0g～5.0g，煎煮1～3次，每次加水5～30倍量，每次煎煮10min～2h，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.20，加乙醇使醇浓度达到50％～90％，静置6～48h，滤取上清液，用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液；(2)HPLC分析：精密吸取供试品溶液20μl进样，色谱条件如下：色谱柱为MerckLichrospher RP-18e(5μm，250×4.0mm)；流动相为甲醇-36％醋酸水混合液(80∶1，调pH至3.0)；采用线性梯度洗脱方式：0min→50min，甲醇：30％→60％，36％醋酸水混合液：70％→40％；流速：1ml/min；检测波长：320nm；得到沙田柚HPLC指纹图谱；(3)测定18批沙田柚样品HPLC指纹图谱并进行比较，得到由其共有峰构成的沙田柚HPLC标准指纹图谱，该指纹图谱具有的13个共有特征峰的保留时间(tR)分别为：7.28min、10.38min、12.11min、17.11min、21.74min、23.05min、25.91min、27.95min、28.85min、32.36min、34.51min、35.95min、44.25min。