[发明专利]快速检测鲨鱼弧菌的试剂盒及其检测方法

摘要

本发明提供了一种检测鲨鱼弧菌的试剂盒及其检测方法，该试剂盒包括增菌培养基即试剂A；聚合酶链式反应试剂：包括反应预混试剂B和试剂C；电泳和显色试剂，包括试剂D、试剂E和试剂F。本发明还提供使用这种试剂盒快速检测鲨鱼弧菌的方法，其优点是快速，准确，灵敏度高；本发明提供的引物对于不含鲨鱼弧菌的检测样本均无扩增信号，说明其具有良好的特异性。本发明可以应用于多种样品的检测，可以检测养殖动物受鲨鱼弧菌感染的情况，也可以监测养殖水体环境中病原鲨鱼弧菌。

主权项

1、一种快速检测鲨鱼弧菌的试剂盒，其特征在于包括增菌培养基、聚合酶链式反应试剂、电泳和显色试剂：(a)增菌培养基即试剂A：含胰化蛋白胨，牛肉膏，酵母提取物和琼脂粉，其重量比为5∶3∶1∶18；(b)聚合酶链式反应试剂：包括反应预混试剂B和试剂C；试剂B含有10倍聚合酶链式反应缓冲液、特异引物对VcS和VcA、dNTP、小牛血清蛋白和灭菌双蒸水，含量分别为2.5～5.0μl、0.5～1.0μl、0.5～1.0μl、0.5～1.0μl、0.5～1.0μl和19.375～38.75μl；试剂C：Taq酶，0.125～0.25μl；(c)电泳和显色试剂，包括试剂D、试剂E和试剂F；试剂D：为50倍TAE，含三羟基甲基氨基甲烷-乙酸和乙二胺四乙酸，浓度分别为0.04M和0.001M；试剂E：为凝胶加样缓冲液，含w/v为40％的蔗糖和0.25％的溴酚蓝和二甲苯青FF；试剂F：0.8～2％琼脂糖+0.5～1μg/ml溴化乙锭。