[发明专利]重组毕赤酵母及其表达NGAL蛋白的方法无效
申请号: | 200610123677.X | 申请日: | 2006-11-21 |
公开(公告)号: | CN1978632A | 公开(公告)日: | 2007-06-13 |
发明(设计)人: | 李恩民;张丕显;吴炳礼;杜则澎;许丽艳 | 申请(专利权)人: | 汕头大学医学院 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/12;C07K14/435;C12R1/84 |
代理公司: | 广州粤高专利代理有限公司 | 代理人: | 陈卫 |
地址: | 515031*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及NGAL蛋白,公开了重组毕赤酵母及其表达NGAL蛋白的方法。本发明通过PCR扩增、连接、转化与筛选,最终获得高效表达NGAL蛋白的重组毕赤酵母菌株。该菌株能将目标蛋白分泌到培养基中,可达>100mg/L,而且无杂蛋白。这使得接续下来的纯化工艺变得十分简单:发酵液经硫酸铵沉淀、脱盐、阳离子交换层析即可。所得蛋白优于原核表达蛋白,糖基化完整,可用于人NGAL功能研究以及临床NGAL检测的标准蛋白。 | ||
搜索关键词: | 重组 酵母 及其 表达 ngal 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
1、一种重组毕赤酵母,其特征在于由如下方法制备而成:(1)PCR扩增NGAL的cDNA;(2)PCR产物与载体pPIC9连接,构建重组质粒pPIC9-NGAL;(3)重组质粒pPIC9-NGAL转化毕赤酵母,得到重组毕赤酵母。
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