[发明专利]一种辣椒抗疫病育种的分子标记辅助选择方法无效
申请号: | 200610123860.X | 申请日: | 2006-11-29 |
公开(公告)号: | CN1970790A | 公开(公告)日: | 2007-05-30 |
发明(设计)人: | 王得元;安康;李颖;王恒明 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院蔬菜研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12P19/34 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 | 代理人: | 李卫东;裘晖 |
地址: | 51064*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种辣椒抗疫病育种的分子标记辅助选择方法。该方法是将辣椒抗疫病育种分离世代材料的植株播种于温室,待幼苗长出5~6片真叶时,每个植株分别取1~2片幼叶,提取DNA。以DNA为模板,利用SCAR标记的两条引物进行PCR扩增。在56~58℃的退火温度下,进行PCR扩增,扩增产物在1.5%琼脂糖凝胶电泳上分离,溴化乙锭染色,观测PCR结果。如果扩增出一条520个碱基对大小的DNA条带,说明该材料抗疫病;如果扩增不出这条520个碱基对大小的DNA条带,说明该材料对疫病表现感病。本发明可对辣椒抗疫病育种分离世代中的单个植株在任何时期进行辣椒抗疫病性能检测且不影响其正常生长;检测迅速,费用低。 | ||
搜索关键词: | 一种 辣椒 疫病 育种 分子 标记 辅助 选择 方法 | ||
【主权项】:
1、一种辣椒抗疫病育种的分子标记辅助选择方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将辣椒抗疫病育种分离世代材料的植株播种于25~30℃、相对湿度50~70%的温室,待幼苗长出5~6片真叶时,每个植株分别取1~2片幼叶,按照SDS方法提取基因组DNA;(2)以上述DNA为模板,利用SCAR标记的两条引物进行PCR扩增,所述SCAR标记的两条引物分别为引物1和引物2,引物1:5′aaa gct gcg gat tta gac ct 3′;引物2:5′aaa gct gcg gtt gaa tcg g 3′;(3)在56~58℃的退火温度下,进行PCR扩增,将扩增产物在1.5%琼脂糖凝胶电泳上分离,溴化乙锭染色,在紫外灯下观测PCR结果;(4)如果扩增出一条520个碱基对大小的DNA条带,说明该材料抗疫病;如果扩增不出这条520个碱基对大小的DNA条带,说明该材料对疫病表现感病。
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