[发明专利]快速检测和鉴定烟草野火病菌及角斑病菌的方法无效

专利信息
申请号: 200610128446.8 申请日: 2006-12-20
公开(公告)号: CN101206193A 公开(公告)日: 2008-06-25
发明(设计)人: 蒋士君;赵志;王枫 申请(专利权)人: 河南农业大学
主分类号: G01N27/447 分类号: G01N27/447;C12Q1/68
代理公司: 郑州中原专利事务所有限公司 代理人: 霍彦伟
地址: 450002*** 国省代码: 河南;41
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摘要: 发明公开了一种快速检测和鉴定烟草野火病菌及角斑病菌的方法,本发明方法是根据烟草野火菌和角斑菌中国菌株的hrpZ全序列,角斑菌株hrpZSeq ID 002,所设计的序列特异性寡核苷酸PCR扩增引物对,以及野火毒素生物合成必需基因的特异性寡核苷酸PCR扩增引物对,即Seq ID 005、Seq ID 006等;利用上述引物对和Taq DNA聚合酶,进行PCR扩增,根据电泳结果即可于2~5小时内快速鉴定出烟草野火病菌和角斑病菌。与传统的细菌鉴定方法相比,不仅方便、快捷,而且准确、可靠、特异性强。
搜索关键词: 快速 检测 鉴定 烟草 野火 病菌 角斑病 方法
【主权项】:
1.一种快速检测和鉴定烟草野火病菌及角斑病菌的方法,其特征在于:本发明方法是根据烟草野火菌和角斑菌中国菌株的hrpZ全序列,即野火菌株hrpZ Seq ID 001,角斑菌株hrpZ Seq ID 002,所设计的序列特异性寡核苷酸PCR扩增引物对,即Seq ID 003、Seq ID 004,以及野火毒素生物合成必需基因的特异性寡核苷酸PCR扩增引物对,即Seq ID 005、Seq ID 006;利用上述引物对和Taq DNA聚合酶,以细菌基因组DNA 50~400ng或菌落或经热激处理的病斑组织浸提液为模板,进行PCR扩增,反应体系20~50ul;PCR产物用0.5~1.4%的琼脂糖凝胶电泳检查,根据电泳结果即可于2~5小时内快速鉴定出烟草野火病菌和角斑病菌。
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