[发明专利]快速检测和鉴定烟草野火病菌及角斑病菌的方法无效
申请号: | 200610128446.8 | 申请日: | 2006-12-20 |
公开(公告)号: | CN101206193A | 公开(公告)日: | 2008-06-25 |
发明(设计)人: | 蒋士君;赵志;王枫 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447;C12Q1/68 |
代理公司: | 郑州中原专利事务所有限公司 | 代理人: | 霍彦伟 |
地址: | 450002*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种快速检测和鉴定烟草野火病菌及角斑病菌的方法,本发明方法是根据烟草野火菌和角斑菌中国菌株的hrpZ全序列,角斑菌株hrpZSeq ID 002,所设计的序列特异性寡核苷酸PCR扩增引物对,以及野火毒素生物合成必需基因的特异性寡核苷酸PCR扩增引物对,即Seq ID 005、Seq ID 006等;利用上述引物对和Taq DNA聚合酶,进行PCR扩增,根据电泳结果即可于2~5小时内快速鉴定出烟草野火病菌和角斑病菌。与传统的细菌鉴定方法相比,不仅方便、快捷,而且准确、可靠、特异性强。 | ||
搜索关键词: | 快速 检测 鉴定 烟草 野火 病菌 角斑病 方法 | ||
【主权项】:
1.一种快速检测和鉴定烟草野火病菌及角斑病菌的方法,其特征在于:本发明方法是根据烟草野火菌和角斑菌中国菌株的hrpZ全序列,即野火菌株hrpZ Seq ID 001,角斑菌株hrpZ Seq ID 002,所设计的序列特异性寡核苷酸PCR扩增引物对,即Seq ID 003、Seq ID 004,以及野火毒素生物合成必需基因的特异性寡核苷酸PCR扩增引物对,即Seq ID 005、Seq ID 006;利用上述引物对和Taq DNA聚合酶,以细菌基因组DNA 50~400ng或菌落或经热激处理的病斑组织浸提液为模板,进行PCR扩增,反应体系20~50ul;PCR产物用0.5~1.4%的琼脂糖凝胶电泳检查,根据电泳结果即可于2~5小时内快速鉴定出烟草野火病菌和角斑病菌。
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