[发明专利]载药或载基因支架的制备方法

摘要

本发明公开了一种载药或载基因支架的制备方法，制备步骤为：(1)支架表面的预处理，包括：溅射或电镀金、固定高分子；(2)药物或基因分子在支架表面的固化包括：支架表面活化、上载体、封闭后再将药物或基因固化，本发明采用多层组装的方法，在支架上稳定连接网状大分子骨架，有利于提高载药量，降低支架和连接分子的毒性及免疫原性，便于临床使用；本发明通过网状分子共价连接糖类、肽类及抗体分子，有利于药物/抗体的稳定牢固连接，又能在胞吞及酶的作用下，起到缓释作用；本发明通过网状分子静电吸附基因分子和转染介导分子，有利于提高基因分子的转染效率。

主权项

1.一种载药或载基因支架的制备方法，其特征是包括如下步骤：(1)支架表面的预处理①溅射或电镀：在洁净干燥的支架原料上直接溅射或电镀金或银成40～1000nm的薄膜，或者先溅射铬成10～50nm的薄膜，然后再溅射或电镀金或银成40～1000nm的薄膜；②固定高分子：将经步骤①处理后的支架用0.001-0.1M的巯基烷醇的乙醇水溶液或0.001-0.1M的巯基烷酸的乙醇水溶液浸泡至少5分钟，所述乙醇水溶液的体积百分浓度为50％～100％，用蒸馏水冲洗，再放入0.01M～10M环氧氯丙烷-碱性二甘醇二甲醚溶液或环氧溴丙烷-碱性二甘醇二甲醚溶液中浸泡至少5分钟，所述碱性二甘醇二甲醚溶液是体积比为1∶1-5的二甘醇二甲醚和0.4M碱金属氢氧化物混合制成，取出后放入pH为3.6-9的0.1g/L-1000g/L高分子水溶液中浸泡至少5分钟；(2)药物或基因分子在支架表面的固化固化的方法为下述步骤之一种：①直接固化：将已固定高分子的支架放入质量浓度为0.01％-10％药物的水溶液或质量浓度为0.01％-10％药物的乙醇水溶液中浸泡至少5分钟或放入0.001-1g/L基因溶液与0.001-1g/L转染试剂溶液的混合溶液中浸泡至少5分钟，所述乙醇水溶液的体积百分浓度为50％～100％，所述基因溶液是将基因溶于pH为5-8的PBS溶液制成，所述转染试剂溶液是将转染试剂溶于pH为5-8的PBS溶液制成；②间接固化：将已固定高分子的支架放入pH为3.6-9的0.1g/L-1000g/L载体水溶液中浸泡至少5分钟，取出，放入质量浓度为0.01％-10％药物的水溶液或质量浓度为0.01％-10％药物的乙醇水溶液中浸泡至少5分钟或放入0.001-1g/L基因溶液与0.001-1g/L转染试剂溶液的混合溶液中浸泡至少5分钟，所述乙醇水溶液的体积百分浓度为50％～100％，所述基因溶液是将基因溶于pH为5-8的PBS溶液制成，所述转染试剂溶液是将转染试剂溶于pH为5-8的PBS溶液制成；③先活化，上载体，封闭后再固化：a.支架表面活化：将经步骤(1)处理的具有羧基表面的支架放入0.01-10M N-羟基丁二酰亚胺和0.01-10M乙基-二甲氨基丙基-碳二亚胺的混合水溶液中浸泡至少1分钟进行表面活化；b.固定化：将表面活化的支架放入pH为3.6-9的0.1g/L-1000g/L载体水溶液中浸泡至少5分钟，取出，放入pH为8-9的0.01-10M盐酸乙醇胺水溶液中浸泡1-30分钟以封闭活化基团，再放入质量浓度为0.01％-10％药物的水溶液或质量浓度为0.01％-10％药物的乙醇水溶液中浸泡至少5分钟或放入0.001-1g/L基因溶液与0.001-1g/L转染试剂溶液的混合溶液中浸泡至少5分钟，所述乙醇水溶液的体积百分浓度为50％～100％，所述基因溶液是将基因溶于pH为5-8的PBS溶液制成，所述转染试剂溶液是将转染试剂溶于pH为5-8的PBS溶液制成；④先连抗体，再固化基因分子：将已固定高分子的支架先放入0.01-10M N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶二硫基)丙酸酯溶液活化的0.01-100g/L抗体溶液中浸泡5-30分钟，再放入0.001-1g/L基因与0.001-1g/L转染试剂的混合溶液中浸泡至少5分钟，所述N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶二硫基)丙酸酯溶液是将N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶二硫基)丙酸酯溶于pH为5-8的PBS溶液制成，所述抗体溶液是将抗体溶于pH为5-8的PBS溶液制成，所述基因溶液是将基因溶于pH为5-8的PBS溶液制成，所述转染试剂溶液是将转染试剂溶于pH为5-8的PBS溶液制成。