[发明专利]仿生制备用于固定化β－葡萄糖醛酸苷酶的二氧化硅－海藻酸微囊的方法

摘要

本发明公开了一种仿生制备用于固定化β－葡萄糖醛酸苷酶的二氧化硅－海藻酸微囊的方法。该方法过程为：将β－葡萄糖醛酸苷酶溶液、氯化钙溶液和羧甲基纤维素钠溶液按一定比例混合后滴加到海藻酸钠溶液中，得到海藻酸微囊；将微囊浸入氯化钙溶液中固化；将固化后的海藻酸微囊浸入硫酸鱼精蛋白或鱼精蛋白溶液中一段时间，得到鱼精蛋白包覆的海藻酸微囊；将包覆有鱼精蛋白的海藻酸微囊浸入硅酸钠溶液中，合成二氧化硅壳层，得到二氧化硅－海藻酸微囊。本发明提供的微囊制备方法简便易行，有效抑制了海藻酸微囊的溶胀，所得的固定化酶活性高，重复使用性好。

主权项

一种仿生制备用于固定化β-葡萄糖醛酸苷酶的二氧化硅-海藻酸微囊的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)海藻酸微囊的制备：将浓度为0.5mg/ml的β-葡萄糖醛酸苷酶溶液，浓度为0.6mol/L的氯化钙溶液和浓度为3.0％w/v的羧甲基纤维素钠溶液按10∶8∶32的体积比混合均匀，滴加到1.0％w/v的海藻酸钠溶液中，搅拌30～60min，去离子水稀释后过滤，再浸入0.1mol/L的氯化钙溶液中固化10min，得到直径2.5～3.5mm的海藻酸微囊；(2)鱼精蛋白在海藻酸微囊外表面的包覆：将步骤(1)得到的海藻酸微囊浸入2～20mg/ml的硫酸鱼精蛋白或鱼精蛋白溶液中，浸泡30～120min后过滤，得到鱼精蛋白包覆的海藻酸微囊；(3)鱼精蛋白调控下的二氧化硅壳层的仿生合成：将步骤(2)得到的微囊浸入30～80mmol/L，pH为5～7的硅酸钠溶液中，浸泡60～120min，过滤，得到二氧化硅-海藻酸微囊。