[发明专利]一种检测白介素－6基因启动子区多态性位点的方法有效
| 申请号： | 200610140463.3 | 申请日： | 2006-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN1952179A | 公开（公告）日： | 2007-04-25 |
| 发明（设计）人： | 田亚平;贾兴旺;邓心新;汪德清;董振南 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军总医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京君智知识产权代理事务所 | 代理人： | 向华 |
| 地址： | 1008*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种检测白介素－6基因启动子区多态性位点的方法，它运用实时荧光PCR仪结合熔点分析在同一反应体系中实现了同时对白介素－6基因启动子区－572G/C，－597G/A两位点多态性的检测。本发明所述的方法与直接测序的检测方法相比，操作简单，成本低廉，结果判断直观，反应快速，并且每一反应都是闭管进行，有效减少了PCR污染的风险。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 白介素 基因 启动 子区 多态性 方法 | ||
【主权项】：
1、一种检测白介素-6基因启动子区多态性位点的方法，它包括下述步骤：(1)设计用于扩增含白介素-6基因-597G/A，-572G/C两位点的DNA片段的引物：正向引物：5’-AAAGGAGTCACACACTCC-3’；反向引物：5’-GCGTTCCAGTTAATTTGTATTTG-3’；(2)设计分别用于检测白介素-6基因启动子区-597G/A，-572G/C两位点的探针，并用不同的荧光素分别标记所述的两对探针：用于检测白介素-6基因启动子区-597G/A位点的探针为：检测探针：5’-CTGCCTGGCCACCCTCA-3’；锚定探针：5’-LC-Red 640-TTTCGTGCAGTTACTTCAAGGCGTCTCCAGG-3’；用于检测白介素-6基因启动子区-572G/C位点的探针为：检测探针：5’-ACAACAGCCCCTCACAGG-3’；锚定探针：5’-LC-Red 705-GAGCCAGAACACAGAAGAACTCAGATGACTG-3’；(3)PCR扩增，并进行荧光检测；(4)描绘熔点曲线；(5)根据得到的特征性熔点曲线，判断待测样品的基因型；(6)对所述的待测样品的基因型进行测序验证。
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