[发明专利]一种针对人OPN基因用于肿瘤基因治疗的短的干扰核糖核酸

摘要

本发明公开了一种针对人OPN基因用于肿瘤基因治疗的短的干扰核糖核酸(short interfering RNA，siRNA)。该siRNA使用RNA干扰技术，通过利用短片断的双链RNA促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断特定基因的表达，诱使细胞表现出特定基因沉默的表型，被研究人员应用到疾病治疗领域。OPN基因表达一种多功能蛋白质，参与人肿瘤发生和转移。它广泛存在于正常成人组织和体液中。我们通过实验证明，抑制OPN基因表达之后，肿瘤细胞生长受到明显抑制。

主权项

1.一种针对人OPN基因用于肿瘤基因治疗的短的干扰核糖核酸(shortinterfering RNA，siRNA)。制备方法包括如下步骤：A.从genebank中调取human OPN基因序列；B.利用GeneChem软件预测有效的siRNA位点；C.合成12个针对OPN基因的siRNA；D.12个siRNA转染293T细胞；E.RT-PCR检测这些siRNA对OPN基因的mRNA的抑制作用；F.Western检测这些siRNA对OPN基因的蛋白表达水平的抑制作用；G.筛选mRNA水平和蛋白质水平抑制作用超过90％的siRNA。H.该siRNA是本权利要求书要求的专利材料。I.对该siRNA进行LNA化学修饰，增加其稳定性。J.将该siRNA构建入病毒载体，进行细胞学和动物水平实验研究。