[发明专利]酶法测定β－丁酮酸试剂盒

摘要

技术领域；本发明涉及一种酶法测定β－丁酮酸试剂盒。本产品是生物工程领域高科技产品，是一种体外诊断试剂。本产品经检索填补了国际空白，本产品经多年研究，解决了酶试剂盒的稳定性问题，省略了原来试剂盒需要冷冻干燥的工艺，降低成本，使用者更加方便。为解决这些问题试剂盒使用了新型防腐剂2－甲基－4－异噻唑－3－酮、抗干扰试剂吐温－80、新型缓冲剂3羟甲基氨基甲烷－盐酸缓冲系统，酶稳定剂蔗糖。这种配方可以使试剂盒由冻干型改为液体型，本产品主要提供全国大中小医院检验科使用，糖尿病酮症酸中毒是一临床常见病，多发病，原因是血酮体增高引起，D－3－羟基丁酸酮体重要组成部分，占酮体总量28％，酮症诊断治疗不及时将有生命危险，β－丁酮酸检测对糖尿病酮症酸中毒具有特异的诊断价值。

主权项

本发明涉及一种酶法测定β-丁酮酸试剂盒试剂盒。1.一种酶法测定β-丁酮酸试剂盒试剂盒，其特征在于含有D-3-羟基丁酸脱氢酶、还原型辅酶I、3羟甲基氨基甲烷、吐温-80、2-甲基-4-异噻唑-3-酮、蔗糖。各组份含量最佳毫摩尔比为每升3羟甲基氨基甲烷60-140，还原型辅酶I 0.26-0.38，D-3-羟基丁酸脱氢酶30-100IU，保护剂蔗糖1-5克，2-甲基-4-异噻唑-3-酮0.1-0.6活性单位、吐温-80 0.1-0.6克。PH6.6-7.2。意义陈述；本发明配方中3羟甲基氨基甲烷作为缓冲剂有维持PH的作用，吐温-80有乳化作用，D-3-羟基丁酸脱氢酶起催化剂作用、2-甲基-4-异噻唑-3-酮起防腐作用，保护剂蔗糖对D-3-羟基丁酸脱氢酶有保护作用，还原型辅酶I参与底物反应，试剂抗干扰能力强，中等程度溶血，乳糜血，血糖20mmol/l以下，胆红素100umol/l以下对测定不产生干扰，本试剂盒为液体试剂，有效期一年。冷藏一年试剂盒中酶活力损失小于5％，还原型辅酶I小于10％，本试剂盒线性范围达5.0mmol/l，正常参考范围0.038-0.286mmol/l，回收率96.5-103.8％之间，变异系数CV＝5.7％，X＝0.26mmol/l，SD＝0.015，n＝20。由3-羟-甲基氨基苯甲烷组成的缓冲系统作为缓冲剂PH6.8-7.2以上各成分含量浓度为测量β-丁酮酸最佳浓度值。本发明的有益效果：3羟甲基氨基甲烷作为缓冲剂有维持PH的作用，吐温-80有乳化作用，D-3-羟基丁酸脱氢酶起催化剂作用、2-甲基-4-异噻唑-3-酮可防腐，本试剂盒使用的保护剂可有效稳定还原型辅酶I。试剂抗干扰能力强，中等程度溶血，乳糜血，血糖20mmol/l以下，胆红素100umol/l以下对测定不产生干扰，冻干试剂冷藏一年，试剂盒中活力损失小于5％，还原型辅酶I破坏小于10％，本试剂盒线性范围达5.0mmol/l，正常参考范围0.038-0.286mmol/l，回收率96.5-103.8％之间，变异系数CV＝5.7％，X＝0.26mmol/l，SD＝0.015，n＝20。本项产品为液体试剂无需冷冻干燥，冷藏有效期一年。