[发明专利]仔猪水肿病大肠杆菌基因突变株及其构建方法无效
| 申请号： | 200610151213.X | 申请日： | 2006-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN1995331A | 公开（公告）日： | 2007-07-11 |
| 发明（设计）人： | 师东方;付海兵 | 申请（专利权）人： | 东北农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/31;C07K14/265;A61K39/108 |
| 代理公司： | 哈尔滨市哈科专利事务所有限责任公司 | 代理人： | 祖玉清 |
| 地址： | 150030黑龙江省哈*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 本发明提供仔猪水肿病大肠杆菌基因突变株及其构建方法。设计扩增编码类志贺氏毒素II型变异体基因及其左侧翼序列的特异性引物；通过PCR扩增获得编码类志贺氏毒素II型变异体基因及其左侧翼序列，分别进行克隆、测序鉴定；设计两对针对基因进行定点突变的突变引物；PCR扩增两个突变片断，分别克隆、测序鉴定；利用二重PCR将两个突变片断连接起来，并克隆、测序鉴定；将突变的基因亚克隆至自杀质粒pCVD442中；诱导致水肿病的0139大肠杆菌的萘啶酮酸抗性；利用突变菌株无Amp及蔗糖抗性，而具有萘啶酮酸抗性，并且其基因PCR产物可特异性的被Stu I核酸内切酶切开成功筛选出完成同源重组的0139大肠杆菌突变株。可以为仔猪水肿病的常规预防提供一种较好的疫苗后备菌株。 | ||
| 搜索关键词： | 仔猪 水肿病 大肠杆菌 基因突变 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
1、一种仔猪水肿病大肠杆菌基因突变株，其特征是：突变后的SLT-IIe*基因特征为：完整的SLT-IIe*基因有两个开放阅读框，共1236个碱基，编码410个氨基酸残基，与野生的仔猪水肿病大肠杆菌0139编码类志贺氏毒素II型变异体的SLT-IIe仅有3个碱基的变异，共有2个氨基酸残基的变异。
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