[发明专利]一种大豆籽粒维生素E的检测方法

摘要

本发明属于农业生产技术领域。是一种大豆籽粒维生素E含量超声萃取、定性定量检测方法。本发明在传统维生素E检测方法的基础上，改进了维生素E的提取方法和液谱检测的流动相等，同时结合大豆籽粒的微量取样方法，实现了单个大豆籽粒维生素E含量的微量测定，在高维生素E大豆育种和品种改良上具有极其重要的现实意义。

主权项

1.一种大豆维生素E的检测方法，其特征在于先对大豆籽粒中的维生素E总量进行超声萃取，再把得到的四种不同结构的维生素E混合物离心后，取上清液在液相色谱以上进行定性和定量检测，提取和检测程序如下：a.样品准备单个籽粒编号后，用壁纸刀片在豆粒的远脐端多次切取薄薄的碎片(注意不要超过籽粒的1/3)，用天平称取10-12毫克，放入编好号的带盖塑料试管中；b.维生素E的提取每个样品中加入1ml母育酚乙醇溶液→匀质器混匀10秒→超声波萃取15分钟→室温静止15分钟→匀质器混匀10秒→超声波萃取15分钟→用离心机以13000转/分钟离心15分钟→将上清液移入ep管→用离心机以13000转/分钟离心5分钟→吸取500μl于2ml顶空瓶中，准备分析；c.维生素E的检测高效液相色谱(HPLC)的检测条件：用长2m，直径3mm的填充柱，检测波长295nm，柱温40℃；流动相为乙氰和甲醇，分流比为9∶1；流速为0.5ml/min；进样量为30μl；重复次数为3次，检测时间为25-30分钟；在检测中α、β、γ、δ-维生素E的保留时间分别在18-19、14-15、15-16和12-13分钟之间，实现了维生素E的定性检测；本发明采用内标法对各种维生素E组分进行定量，大豆籽粒中各种维生素E组分含量由对应的峰面积与内标物的峰面积的比值求得。