[发明专利]核糖体展示方法或mRNA展示方法以及对蛋白质改进的稳定性进行的选择无效

专利信息
申请号: 200680007212.6 申请日: 2006-01-05
公开(公告)号: CN101180393A 公开(公告)日: 2008-05-14
发明(设计)人: 安德鲁·布坎南;卢茨·杰姆图斯 申请(专利权)人: 剑桥抗体技术有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 北京市柳沈律师事务所 代理人: 闵丹;巫肖南
地址: 英国*** 国省代码: 英国;GB
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摘要: 一种利用RNA表达体系,通过翻译和选择而获得比亲本目标多肽稳定性改进的目标多肽变体的方法,其中在翻译过程中同时使用两种或更多种稳定性选择压力,在选择过程中同时使用两种或更多种稳定性选择压力,或在翻译过程中且继续在选择过程中使用至少一种稳定性选择压力,且在选择过程中使用至少另外一种稳定性选择压力。
搜索关键词: 核糖体 展示 方法 mrna 以及 蛋白质 改进 稳定性 进行 选择
【主权项】:
1.一种提供比亲本目标多肽稳定性改进的目标多肽变体的方法,该方法包括:(a)提供多个mRNA分子,每一mRNA分子包含编码目标多肽变体的核苷酸序列且缺失框内终止密码子;(b)保温所述mRNA分子,所用的保温条件致使所述mRNA分子发生核糖体翻译,产生所编码的目标多肽变体,由此形成多个复合体,每个复合体都至少含有mRNA和所编码的目标多肽变体;(c)将这些复合体与结合所述亲本目标多肽的受体、配体或特异性结合配对物接触,选出一个或多个复合体,它们每一个都在该选择条件下展示出与所述受体、配体或特异性结合配对物结合的目标多肽变体;其中,如下进行步骤(i),(ii)和(iii)中的一步或多步;(i)在步骤(b)的翻译过程中,同时使用两种或更多种稳定性选择压力;(ii)在步骤(c)的选择过程中,同时使用两种或更多种稳定性选择压力;(iii)至少一种稳定性选择压力在步骤(b)的翻译过程中、继而在步骤(c)的选择过程中使用,且至少一种另外的稳定性选择压力在步骤(c)的选择过程中使用;和(d)确定所选的一或多种目标多肽变体的稳定性,从而获得比亲本目标多肽稳定性改进的一种或多种目标多肽变体。
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