[发明专利]采用哺乳动物细胞确立人胚胎干细胞系

摘要

本发明公开了纯化的并具有某些谱系特异性状的人胚胎干细胞制剂。鉴定所述制剂是通过阳性表达下述多能细胞表面标记：SSEA－1(－)、SSEA－4(+)、TRA－1－60(+)、TRA－1－81(+)、碱性磷酸酶(+)、和一组ES细胞标记包括Oct－4、Nang、Rex1、Sox2、Thy1、FGF4、ABCG2、Dppa5、UTF1、Criptol、hTERT、间隙连接蛋白43和间隙连接蛋白45。所述制剂细胞对下述谱系特异标记是阴性的：角蛋白8、Sox－1、NFH(外胚层)，MyoD、brachyury、心－肌动蛋白(中胚层)，HNF－3β、白蛋白和PDX1(内胚层)。所述制剂的细胞是人胚胎干细胞，具有正常核型，显示高端粒酶活性且在连续传代培养超过40代后能够以未分化状态继续繁殖。胚胎干细胞系Relicell^TMhES1在整个培养过程也保持这种能力，直到分化为细胞和组织类型，其衍生自所有三层胚胎生殖层(内胚层、中胚层和外胚层)。本发明也公开了分离人胚胎干细胞的方法。

主权项

1.人多能胚胎干细胞的纯化制剂，其中所述细胞包括：(i)能够分化为如下衍生物：内胚层、中胚层和外胚层组织，(ii)正常核型，(iii)能够体外培养增殖至少约25代，和(iv)一种或多种如表4所列的人白细胞抗原(HLA)等位基因。