[发明专利]可放大的发酵方法有效
申请号: | 200680023620.0 | 申请日: | 2006-05-24 |
公开(公告)号: | CN101213294A | 公开(公告)日: | 2008-07-02 |
发明(设计)人: | M·埃默林格;F·亨内克;H·普夫伦德;M·里尔;P·斯坦纳 | 申请(专利权)人: | 赛托斯生物技术公司 |
主分类号: | C12N7/02 | 分类号: | C12N7/02;C12P21/02 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 | 代理人: | 孟凡宏 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | 本发明提供了一种表达通过自装配形成VLP的噬菌体衣壳蛋白的高效的发酵方法,其中该方法可放大至商业生产规模,并且其中控制衣壳蛋白的表达速率以获得提高的可溶性衣壳蛋白的产量。这可通过将补料分批培养和乳糖诱导表达系统的优点与特定过程参数相结合而获得,所述参数提供在生长期中提高的启动子阻遏和贯穿该过程的高质粒保持。 | ||
搜索关键词: | 放大 发酵 方法 | ||
【主权项】:
1.一种表达能够通过自装配形成VLP的噬菌体重组衣壳蛋白或其突变体或片段的方法,所述方法包括以下步骤:a)将一种表达质粒导入细菌宿主中,其中所述表达质粒包含一种表达构建体,其中所述表达构建体包含(i)编码所述重组衣壳蛋白或其突变体或片段的第一核苷酸序列,和(ii)可被乳糖诱导的启动子;b)在包含主碳源的培养基中培养所述细菌宿主;其中所述培养以分批培养方式在所述启动子被lacI阻遏的条件下进行,其中所述细菌宿主过量表达所述lacI;c)用所述主碳源向所述分批培养物中补料;和d)利用一种诱导物诱导所述启动子,其中继续用所述主碳源向所述分批培养物中补料。
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