[发明专利]用于生产重组蛋白质的翻译融合配偶体文库和从中筛选的翻译融合配偶体有效
申请号: | 200680033245.8 | 申请日: | 2006-07-13 |
公开(公告)号: | CN101310023A | 公开(公告)日: | 2008-11-19 |
发明(设计)人: | 孙廷薰;崔毅星;裴贞勋;申美景;尹成淑;田昌秀 | 申请(专利权)人: | 韩国生命工学研究院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 | 代理人: | 郑小粤;常慧 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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摘要: | 本发明涉及快速筛选适当的翻译融合配偶体(TFPs)的技术,所述的翻译融合配偶体能够诱导重组蛋白质特别是使用常规制备方法难以生产的蛋白质的分泌生产。 | ||
搜索关键词: | 用于 生产 重组 蛋白质 翻译 融合 配偶 文库 从中 筛选 | ||
【主权项】:
1.鉴定靶蛋白特异的翻译融合配偶体(TFP)的方法,所述方法包括:(i)用多个线性载体和一个编码靶蛋白的核酸共转化多个报告蛋白缺乏的宿主细胞来制备多个被转化的宿主细胞,其中每个所述线性载体包含一个来自于核酸片段文库中的核酸片段和一个编码N末端氨基酸缺失的报告蛋白的核苷酸序列,和其中所述编码靶蛋白的核酸在3’末端包含一个编码N末端氨基酸的核苷酸序列,其中在所述线性载体内所述报告蛋白缺乏该N末端氨基酸,并在5’末端包含一个连接DNA;(ii)在允许所述线性载体和所述编码靶蛋白的核酸体内重组的有效条件下培养所述的多个被转化的宿主细胞;(iii)从(ii)中的多个被转化的宿主细胞中鉴定出显示报告蛋白活性的细胞;和(iv)从(iii)中鉴定的细胞中鉴定出TFP;其中所述TFP包含诱导所述靶蛋白分泌的核酸片段。
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