[发明专利]cDNA文库制备无效

专利信息
申请号: 200680034002.6 申请日: 2006-09-18
公开(公告)号: CN101263227A 公开(公告)日: 2008-09-10
发明(设计)人: S·K·哈奇森;J·F·西蒙斯;D·A·威洛比 申请(专利权)人: 454生命科学公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/68
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 代理人: 权陆军;梁谋
地址: 美国康*** 国省代码: 美国;US
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摘要: 提供了使用与自动化测序系统相容的衔接子序列,用于使mRNA样品高通量加工成cDNA文库的新生物化学规程。所提供的方法生产没有与目前cDNA文库生产方法相关的3’偏倚的cDNA文库。还提供了用于从DNA生产DNA文库的新方法。
搜索关键词: cdna 文库 制备
【主权项】:
1. 一种用于从RNA产生文库的方法,其包括下述步骤:(a)使所述RNA断裂以产生断裂的RNAs;(b)使多个引物与所述断裂的RNAs杂交以形成杂交的引物;(c)用逆转录酶使所述杂交的引物延长,以从所述RNA形成多个单链cDNAs,其中所述单链cDNAs在5’末端包含所述多个引物;(d)使第一种衔接子与所述cDNA的所述5’末端连接,其中所述衔接子包含与所述单链cDNA的5’末端互补的突出5’末端区域,和连接包含与所述cDNA的3’末端互补的突出3’末端区域的第二种衔接子,以形成包含在5’末端的第一种衔接子和在3’末端的第二种衔接子的单链cDNA;(e)使所述单链cDNAs纯化以产生所述cDNA文库。
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