[发明专利]用于琥珀酸盐之生长关联性生产的方法和生物

摘要

本发明提供了一种非天然微生物，它包含编码一种酶(这种酶在其活性降低时与琥珀酸盐之生长关联性生产有关)的一个或多个基因中断，该一个或多个基因中断藉此使该非天然微生物具备了稳定的琥珀酸盐之生长关联性生产能力。另外，本发明也提供了一种非天然微生物，它包含一组将琥珀酸盐生产与微生物生长专向关联起来的代谢路径改造，而这组代谢路径改造由以下基因组合中选择的一个或多个基因中断组成：(a)adhE，ldhA；(b)adhE，ldhA，ackA－pta；(c)pfl，ldhA；(d)pfl，ldhA，adhE；(e)ackA－pta，pykF，atpF，sdhA；(f)ackA－pta，pykF，ptsG；或(g)ackA－pta，pykF，ptsG，adhE，ldhA；或其直系同源基因，其中该微生物表现出稳定的琥珀酸盐之生长关联性生产。本发明还提供了一种非天然微生物，其基因可对进一步包括pykA，atpH，sdhB或dhaKLM中至少一个基因中断的代谢路径改造(e)ackA－pta，pykF，atpF，sdhA进行编码；或一种非天然微生物，其基因可对进一步包括pykA或dhaKLM中至少一个基因中断的代谢路径改造(f)ackA－pta，pykF，ptsG进行编码；或另一种非天然微生物，其基因可对进一步包括pykA或dhaKLM中至少一个基因中断的代谢路径改造(g)ackA－pta，pykF，ptsG，adhE，ldhA进行编码。这些中断可以是完全的基因中断，而此非天然生物可包括各种原核或真核微生物。本发明也提供了制备能够稳定进行琥珀酸盐之生长关联性生产的非天然微生物的方法。该方法包括：(a)利用电脑模拟识别在指数增长阶段要求琥珀酸盐生产的一组代谢路径改造；以及(b)在遗传上改变一种微生物以便让其包含一组要求琥珀酸盐生产的代谢路径改造。

主权项

1.非天然微生物中包含一个或多个基因中断，而此基因中断发生在对一种酶进行编码的基因中，这种酶会在其活性被上述基因中断降低时，将琥珀酸盐的生产与微生物生长专向关联起来，因而此基因中断可以将稳定的琥珀酸盐之生长关联性生产传递给此非天然微生物。