[发明专利]白眉蝮蛇去整合素定点突变体cDNA的克隆、表达及其蛋白质制法与应用

摘要

本发明涉及生物领域。白眉蝮蛇去整合素定点突变体cDNA的克隆、表达及其蛋白质制法与应用，白眉蝮蛇蛇毒突变体蛋白质的cDNA序列将白眉蝮蛇去整合素cDNA序列中A145、T146、G148突变成C145、C146和A148，得cDNA含219个碱基对，与相应的蛋白质序列及在大肠杆菌和毕赤酵母中的表达，制备方法简单易操作，从白眉蝮蛇毒腺中分离提取出总RNA，利用RT－PCR的方法反转录出总cDNA，对其进行定点突变得到一条长度为219bp的多核苷酸序列。还提供一个大肠杆菌BL21和毕赤酵母菌中成功表达的分子量约为8000的小分子量蛋白质。此蛋白质具有显著的抗血管生成作用，而无抑制血小板聚集作用。其在抗肿瘤的药物中的应用，具有较高的安全性及较低的副作用，具有更高的应用价值。

主权项

1.白眉蝮蛇去整合素的定点突变体cDNA序列，其特征是：将白眉蝮蛇去整合素cDNA序列中A145、T146、G148突变成C145、C146和A148，得cDNA含219个碱基对，核苷酸序列为：GAGGCCGGAG AAGAATGTGA CTGTGGCTCT CCTGGAAATC CGTGCTGTGA 50TGCTGCAACC TGTAAACTGA GACAAGGAGC ACAGTGTGCA GAAGGACTGT 100GTTGTGACCA GTGCAGATTT ATGAAAAAAG GAACAGTATG CCGGCCAACA 150AGGGGTGATG ACATGGATGA TTACTGCAAT GGCATATCTG CTGGCTGTCC 200CAGAAATCCC TTCCATGCC 219。