[发明专利]恶臭假单胞菌甲醛脱氢酶基因、编码蛋白及重组载体无效
申请号: | 200710012803.9 | 申请日: | 2007-09-12 |
公开(公告)号: | CN101386862A | 公开(公告)日: | 2009-03-18 |
发明(设计)人: | 赵宗保;王金霞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | C12N15/53 | 分类号: | C12N15/53;C12N9/04;C12N15/65 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 | 代理人: | 马 驰;周秀梅 |
地址: | 116023*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明涉及恶臭假单胞菌甲醛脱氢酶基因、编码蛋白及重组载体,本发明以恶臭假单胞菌AS 1.643基因组DNA为模板,用PCR方法,分离得到新基因fdhA,编码蛋白质甲醛脱氢酶PFDH。将fdhA克隆于表达载体pET24b(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中甲醛脱氢酶PFDH一部分以胞内可溶的形式存在,其可溶蛋白表达量为13.7mg/L。通过镍亲和层析纯化,得到纯度为95%以上的重组蛋白PFDH,得率11mg/L。该重组PFDH在NAD+存在下催化甲醛脱氢形成甲酸,最高比活可达38U/mg,对甲醛的表观Km为0.116±0.016mM。我们将重组PFDH用在生物分析过程、CO2转化为甲醇以及生物功能研究中。 | ||
搜索关键词: | 恶臭 假单胞菌 甲醛 脱氢酶 基因 编码 蛋白 重组 载体 | ||
【主权项】:
1. 一种恶臭假单胞菌甲醛脱氢酶基因,其特征在于:具有序列表SEQID No:1中核苷酸序列。
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