[发明专利]一种由微球菌制备生物多聚物絮凝剂的方法

摘要

本发明提供一种由微球菌制备生物多聚物絮凝剂的方法，包括菌种选育、发酵培养及生物产品制备。发明选用微球菌为生物多聚物絮凝剂的产生菌种，经过具有特别组合比例的培养基进行发酵及生物分离制得用于水质净化的高效生物多聚物絮凝剂。本发明的生物多聚物絮凝剂具有无毒、无害、可生物降解的特点，其优点是生产成本低、应用范围广、使用效率高、应用无二次污染，发明的生物多聚物絮凝剂集聚集、絮凝与吸附功能于一体，应用于水质净化、水质澄清、生物产品分离等效果显著。

主权项

1.一种由微球菌制备生物多聚物絮凝剂的方法，其特征在于选用微球菌为生产菌种，经发酵培养和生物分离制得水质净化生物多聚物絮凝剂，该絮凝剂的制备采用以下步骤：a)菌种的制备由变质的淀粉类发酵食品采样，经分离获得微球菌(Micrococcus)LF-Man10；初选培养基的重量组成(g/L)：酪素水解物10-15 蛋白胨2-8 葡萄糖20-50 K2HPO42-6 1％结晶紫水溶液0.1ml 琼脂15-25 pH7.0 蒸馏水1000ml 1ml 1％的亚碲酸钾水溶液；复选培养基的重量组成(g/L)：酪素水解物10-15 葡萄糖20-50 K2HPO4 2-5 NaCl 10-50 MgSO4 2-5 琼脂15-25pH7.0蒸馏水1000ml；分离方法：用初选培养基制作平板，用样品溶液进行平板划线，37℃培养2-3天，然后在24℃继续培养1-3天，挑取暗蓝、粘性菌落，将初选的菌落在复选的平板上进行划线，并在37℃下培养2-3天，挑取生长快、絮凝活性高的菌落转入斜面试管进行保藏；b)发酵培养液体发酵培养基的重量组成为：淀粉糖20-50份 豆饼粉浸出物10-30份 (NH4)2SO4 0.5-3份 K2HPO4 0.5-3份 NaCl0.1-1.0份 MgSO4 0.2-0.8份 pH7.0 发酵用水1000ml；发酵罐中液体培养基的2-10％的体积接入微球菌液体菌种，在25-37℃、pH5-7.6、通入无菌空气量为0.25-1.2V/V条件下，培养1-2天备用；c)生物多聚物絮凝剂的制备(1)将发酵液通过粗过滤去除杂质，取过滤液备用；(2)把过滤液调为pH3-6、用离心机离心10-30分钟，去除菌体沉淀，取上清液备用；(3)将上清液通过0.30μm-0.03μm梯度串联膜组合过滤，去除有机及无级小分子，得分级大分子液备用；(4)在分级大分子液中在80-300rpm下加入0.05-0.35％CaCl2和1.6-2.5倍体积的无水乙醇，静止10-25分钟，用离心机离心5-20分钟，得离心后固形物备用；(5)将离心后固形物醇洗，在35-60℃下真空干燥，粉碎至80目，得水处理用生物多聚物絮凝剂产品。