[发明专利]一种南瓜多糖分离纯化的方法及所得组分的用途

摘要

本发明涉及采用热水溶解和乙醇分级沉淀的分离技术从南瓜中分离得到南瓜多糖的三种组分50％乙醇沉淀物，70％乙醇沉淀物和80％乙醇沉淀物。其步骤是采用热水浸提获得南瓜水提液，有机溶剂沉淀，沉淀用水溶解，上清液浓缩，除蛋白，经乙醇分级沉淀获得南瓜多糖的三种组分50％乙醇沉淀物，70％乙醇沉淀物和80％乙醇沉淀物。本发明方法工艺简单，适宜工业化生产。经生物活性试验表明，三种多糖组分无毒副作用，多糖组分50％乙醇沉淀物和70％乙醇沉淀物能抑制大鼠胰岛β细胞的凋亡和保护损伤的大鼠胰岛β细胞，80％乙醇沉淀物能抑制白血病细胞增殖，诱导其凋亡和分化。

主权项

1.一种南瓜多糖的分离纯化方法，其特征在于：(1).取新鲜成熟的南瓜，去皮，去籽，切片，经0.38％亚硫酸氢钠溶液浸泡60min后，取出冲洗干净，添加3倍重量的蒸馏水在75～80℃水浴上，搅拌提取3次，时间分别为6小时，4小时和4小时，过滤；(2).将所得滤液合并后，离心，取上清液真空浓缩，在浓缩液中加入3倍体积95％乙醇搅拌均匀，冰箱放置过夜，离心得沉淀物；(3).取沉淀物用去离子水充分溶解得到水溶液，Sevag法除蛋白：即在水溶液中加入1/2体积的氯仿和正丁醇混合溶液，氯仿∶正丁醇＝4∶1，振荡使其充分混匀，然后3000rmin-1离心15min，除去水溶液与有机溶液交界处的灰白色变性蛋白；水溶液仍按此法反复去蛋白，共3次；(4).水溶液浓缩后，加入95％乙醇，使溶液中乙醇含量为50％，，加入乙醇后静置过夜，溶液离心，得到沉淀物，沉淀物用95％乙醇，无水乙醇，丙酮依次洗涤，冷冻干燥，得到分离后的南瓜多糖组分50％乙醇沉淀物；上述50％乙醇溶液中再加入95％乙醇，使溶液中乙醇含量为70％，，加入乙醇后静置过夜，溶液离心，得到沉淀物，沉淀物用95％乙醇，无水乙醇，丙酮依次洗涤，冷冻干燥，得到分离后的南瓜多糖组分70％乙醇沉淀物；上述70％乙醇溶液中再加入95％乙醇，使溶液中乙醇含量为80％，加入乙醇后静置过夜，溶液离心，得到沉淀物，沉淀物用95％乙醇，无水乙醇，丙酮依次洗涤，冷冻干燥，得到分离后的南瓜多糖组分80％乙醇沉淀物。