[发明专利]一种平阳霉素诱导菊花矮化育种的方法

摘要

本发明是一种用平阳霉素诱导菊花矮化育种的方法，属于菊花化学诱变育种领域。取脚芽为外植体，以腋芽进行继代培养。在附加1～8mg·L^－1平阳霉素的MS培养基上进行诱变处理，20d后转接到不含诱变剂的MS培养基上。本发明将组织培养与化学诱变育种相结合，提高了体细胞无性系变异的发生频率，促进了突变育种的成功。与传统菊花杂交育种相比，周期短，工作量小；与转基因、原生质融合等生物技术相比，设备要求简单，操作简便、安全性高。本发明处理得到的菊花株高平均值约占未处理菊花株高77.5～88.3％。

主权项

1、一种平阳霉素诱导菊花矮化育种的方法，包括：1)无菌苗的获得材料为‘意大利红’品种，取菊花供试品种脚芽为外植体，进行表面消毒后接种于以MS为基本培养基，附加0.5mg·L-16-BA和0.1mg·L-1NAA的培养基上，培养20d后将腋芽处产生的幼苗转接以MS为基本培养基，附加1.0mg·L-16-BA和0.1mg·L-1NAA的培养基上，培养30d后得到的幼苗即可作为诱变处理的无菌幼苗；2)化学诱变处理取上述无菌幼苗的带有2～3个芽的茎段为处理材料，接种于MS基本培养基中，附加1.0mg·L-16-BA、0.1mg·L-1NAA和1～8mg·L-1平阳霉素，处理20d；3)继代和扩繁将上述处理材料转接到不含平阳霉素的MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA的愈伤组织诱导培养基上，30d后转接到MS+2.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA的愈伤组织分化培养基上，获得分化的幼苗；4)生根、驯化和移栽将分化的幼苗转接入生根培养基中，15d后栽进灭菌后的珍珠岩中，每天浇水一次，3～4d浇MS营养液一次，30d后栽入苗圃，获得矮化的菊花育种材料；上述各培养基中琼脂含量质量百分比为0.65％，蔗糖质量百分比为3％，灭菌前pH6.0～6.2，各阶段培养条件为温度25+2℃，光照强度2000Lux，光照时间12h/d。