[发明专利]一种基于PCR技术的番茄杂交种纯度检测方法无效
申请号: | 200710020044.0 | 申请日: | 2007-02-09 |
公开(公告)号: | CN101017151A | 公开(公告)日: | 2007-08-15 |
发明(设计)人: | 柳李旺;王燕;龚义勤;赵统敏 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447;G01N21/78;G01N21/84;C12Q1/68 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 210095江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种基于PCR技术的番茄杂交种纯度检测方法,属于生物技术领域。本发明以商品杂交种番茄“苏粉8号”为对象,开展分子标记的筛选,鉴定出在杂种中能够同时产生父母本特异条带的1个RAPD与1个SSR标记引物。RAPD标记引物产生母本特异标记NAURP409800,父本特异标记NAURP4091100;SSR标记引物产生母本特异标记NAUSSRTOM47140与父本特异标记NAUSSRTOM47148。两个标记可有效用于鉴定番茄杂交种种子的纯度,同时两个标记可以相互验证,确定商品种的遗传纯度,利于番茄杂交种种子高效准确的质量控制,加快了番茄商品种子的质量检测进程。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 pcr 技术 番茄 杂交种 纯度 检测 方法 | ||
【主权项】:
1、一种基于PCR技术的番茄杂交种纯度检测方法,包括以下步骤:(1)提取番茄杂交种‘苏粉8号’幼苗叶片基因组DNA;(2)选用RAPD引物NAURP409:CCACATCGGT和SSR引物对NAUSSRTOM47F:TCCTCAAGAAATGAAGCTCTGANAUSSRTOM47R:CCTTGGAGATAACAACCACAA以基因组DNA为模板,进行PCR扩增;(3)对扩增产物进行凝胶电泳;(4)对电泳结果进行分析,只有同时具有亲本特异条带的单株才为真正的杂交种,缺少其中的任意一个条带均被视为假杂种,计算其种子遗传纯度,其中:RAPD引物NAURP409产生大小为800bp的母本特异标记NAURP409800,产生大小为1100bp父本特异标记的NAURP4091100;SSR引物NAUSSRTOM47产生大小为140bp的母本特异标记NAUSSRTOM47140,产生大小为148bp的父本特异标记NAUSSRTOM47148。
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