[发明专利]重组人中期因子(rh－Midkine)的表达及其单克隆抗体的制备和应用无效
| 申请号： | 200710021657.6 | 申请日： | 2007-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN101294164A | 公开（公告）日： | 2008-10-29 |
| 发明（设计）人： | 侯亚义;赵树立;王庆苓;黄亚红;王会;谢浩 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/12;C12N1/21;C12P21/02;C07K19/00;C07K16/18;C12N5/18;A61K39/395;G01N33/577;G01N33/574;G01N33/49;G01N33/493;A61P35/00 |
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| 地址： | 210093江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于生物医药领域，公开了一种重组人中期因子(rh－Midkine)的表达及其单克隆抗体的制备和应用。特征是通过大肠杆菌进行人中期因子(Midkine，MK)的原核表达，得到的重组蛋白30P－MK具有促进细胞增殖的生物活性，为MK在肿瘤、细胞生物学和神经系统等方面的研究提供基础；30P－MK蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠，取脾细胞与SP2/0细胞融合、筛选得到抗人MK单克隆抗体杂交瘤，所分泌的单抗为IgG1，通过对人肿瘤组织样品中中期因子Western－blotting和免疫组化的检测实验验证表明得到的单抗特异性强，背景低，可发展成为诊断试剂盒用于临床和实验室检测肿瘤组织和血清中MK的表达水平，为通过MK单抗靶向治疗肿瘤奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 人中 因子 rh midkine 表达 及其 单克隆抗体 制备 应用 | ||
【主权项】：
1、一种重组质粒载体，其特征是该载体为pET 30a/midkine，它含有适合于在原核细胞宿主中可溶性表达的人中期因子(midkine，MK)，具有如下所示的核苷酸序列：CATATGGGCCATCGCCGGCTGGGCAGCGAGGAGCAGCAGACCAGCAGCAGCGGTCGGCAGCAGGTATTTCCATGGAAAAAGAAAGATAAGGTGAAGAAGGGCGGCCCGGGGAGCGAGTGCGCTGAGTGGGCCTGGGGGCCCTGCACCCCCAGCAGCAAGGATTGCGGCGTGGGTTTCCGCGAGGGCACCTGCGGGGCCCAGACCCAGCGCATCCGGTGCAGGGTGCCCTGCAACTGGAAGAAGGAGTTTGGAGCCGACTGCAAGTACAAGTTTGAGAACTGGGGTGCGTGTGATGGGGGCACAGGCACCAAAGTCCGCCAAGGCACCCTGAAGAAGGCGCGCTACAATGCTCAGTGCCAGGAGACCATCCGCGTCACCAAGCCCTGCACCCCCAAGACCAAAGCAAAGGCCAAAGCCAAGAAAGGGAAGGGAAAGGACCTCGAG
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