[发明专利]一种酶拆分制备(R)－6－羟基－8－氯辛酸乙酯的方法

摘要

一种酶拆分制备(R)－6－羟基－8－氯辛酸乙酯的方法，属于生物催化技术领域。本发明利用脂肪酶拆分底物外消旋6－羟基－8－氯辛酸乙酯，制备(R)－6－羟基－8－氯辛酸乙酯，首先筛选出立体选择性较好的脂肪酶，然后对酶拆分的一系列转化条件如摇床转速，反应温度，反应pH，底物浓度以及表面活性剂或有机辅溶剂的添加进行优化，产物光学纯度达到93.8％，收率达到46.7％。同时利用6－羟基－8－氯辛酸乙酯和6－羟基－8－氯辛酸在不同pH下的溶解度差异，对产物进行了初步分离，分离后得到的粗品中(R)－6－羟基－8－氯辛酸乙酯的含量为83.4％，提取收率为92.4％。(R)－6－羟基－8－氯辛酸乙酯是制备(R)－硫辛酸的中间体，本发明为(R)－硫辛酸的制备提供一条可行的途径。

主权项

1.一种酶拆分制备(R)-6-羟基-8-氯辛酸乙酯的方法，其特征是以具有立体选择性的脂肪酶为催化剂，在单一水相或水/有机溶剂两相体系中，对外消旋6-羟基-8-氯辛酸乙酯进行拆分，制备光学纯(R)-6-羟基-8-氯辛酸乙酯，步骤如下：(1)酶源：选用脂肪酶CRL、脂肪酶L-3124、脂肪酶L-3126、脂肪酶LipaseIM、脂肪酶Lipase MY、脂肪酶Lipase PS-D、碱性脂肪酶或青霉脂肪酶；(2)配制反应体系：以外消旋6-羟基-8-氯辛酸乙酯为底物，用pH6.0～7.0的磷酸盐缓冲液配制成反应体系，底物浓度为20～180mmol/L；(3)转化反应：在反应体系中加入脂肪酶启动反应，加酶浓度为5～20g/L，酶反应温度为30～60℃，摇床转速为150～210r/min，反应时间为0.5～2h，反应结束，离心去除脂肪酶，得到上清液；(4)萃取处理：上清液调pH至9.0～10.0，用乙酸乙酯萃取分离，得到含有(R)-6-羟基-8-氯辛酸乙酯的有机相，用适量无水MgSO4干燥过夜，过滤后进行气相色谱测定含量和对映体过量值；(5)回收副产物：将萃取分离有机相后的剩余水相调pH至2.0～3.0，用乙酸乙酯萃取，分离有机相得到(S)-6-羟基-8-氯辛酸；(6)产物提取：将含有(R)-6-羟基-8-氯辛酸乙酯的有机相进行旋转蒸发，得到粗产品，进行气相色谱分析、称重、测旋光。