[发明专利]一种检测志贺氏菌及其ipaH毒力岛的方法及试剂盒

摘要

本发明涉及检测临床样品中志贺氏菌(Shigella)菌属细菌及其ipaH毒力岛(PAI)存在的方法及试剂盒，特别是涉及以实时荧光定量聚合酶链反应技术检测志贺氏菌(Shigella)菌属细菌的方法和试剂盒。

主权项

1. 一种使用实时荧光定量聚合酶链反应技术定量检测样品中志贺氏菌属(Shigella)细菌(痢疾杆菌)及其ipaH毒力岛(PAI)存在的方法，该方法包括：(1)提供包括样品、核酸扩增体系，和荧光监测体系的反应与检测混合物，(2)通过扩增反应循环扩增所说的靶多核苷酸，(3)使所说的荧光发生基团与被扩增的靶多核苷酸间接结合，(4)确定荧光发生基团所产生的荧光量，(5)分析扩增循环后产生的荧光量以确定靶多核苷酸的存在及其相对量；其中核酸扩增体系包括可与靶多核苷酸结合的寡核苷酸引物，并且荧光监测体系包括可与靶多核苷酸结合的寡核苷酸探针，特征在于所使用的寡核苷酸引物序列包括：正向引物ipaH-F：5’-gct gtt gct gct gat gcc a-3’(SEQ ID NO：1)和反向引物ipaH-R：5’-gat gcc tga tgg acc agg ag-3’(SEQ ID NO：2)，由正向引物ipaH-F向5’端方向延伸5个碱基、向3’端方向延伸5个碱基范围内得到的引物序列或能与这段范围内的序列可以杂交的引物序列；以及由反向引物ipaH-R向5’端方向延伸5个碱基、向3’端方向延伸5个碱基范围内所得到的引物序列或能与这段范围内的序列可以杂交的引物序列。