[发明专利]华贵栉孔扇贝微卫星标记的构建方法有效
申请号: | 200710027649.2 | 申请日: | 2007-04-23 |
公开(公告)号: | CN101041856A | 公开(公告)日: | 2007-09-26 |
发明(设计)人: | 王艳红;喻子牛 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南海海洋研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12P19/34 |
代理公司: | 广州科粤专利代理有限责任公司 | 代理人: | 赖汉光 |
地址: | 510301广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 提供一种华贵栉孔扇贝微卫星标记的构建方法,包括DNA的提取;酶切连接接头以及杂交前预扩增;用生物素标记的微卫星探针和SAV磁珠杂交富集微卫星序列,得到富含微卫星序列的DNA片断,然后对片段进行扩增;构建富含微卫星片段的富集文库,并利用PCR进行微卫星序列筛选;对阳性克隆进行测序,得到DNA序列结果;对含有微卫星序列的片段进行质量分析比较,对优质微卫星序列片段设计引物;利用PAGE检测筛选微卫星的扩增性、多态性、稳定性,统计相应群体遗传学参数;它操作简单,安全,结果真实可靠,效率高,阳性率高;用于遗传变异分析、种质保护与管理、连锁图谱构建及优良亲本群体的筛选和遗传选育。 | ||
搜索关键词: | 华贵 扇贝 卫星 标记 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.一种华贵栉扇贝微卫星标记的构建方法,依次包括下列程序:(1)DNA的提取;(2)酶切连接接头以及杂交前预扩增;(3)用生物素标记的微卫星探针和SAV磁珠杂交富集微卫星序列,得到富含微卫星序列的DNA片断,然后对这些片段进行扩增;(4)构建富含微卫星片段的富集文库,并利用PCR进行微卫星序列筛选;(5)对筛选出来的阳性克隆进行测序,得到阳性克隆的DNA序列结果;(6)对含有微卫星序列的片段进行质量分析比较,对优质微卫星序列片段设计引物;(7)利用PAGE检测筛选微卫星的扩增性、多态性、稳定性,统计相应群体遗传学参数。
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