[发明专利]一种检测曲霉菌荧光定量PCR试剂盒

摘要

本发明提供了一种检测曲霉菌荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒含有引物：5’－CGGAAGGATCATTACCGAGTGA－3’(SEQ NO.1)，5’－CCCGCCGAAGCAACAAG－3’(SEQ NO.2)；和荧光探针：5’FAM－CCAACCTCCCACCCGTGTCTATYGT－BHQ－1 3’(SEQ NO.3)。本发明试剂盒特异性扩增曲霉菌ITS I区间的基因，产物大小为79bp，能快速准确地检测出常见的多种致病曲霉菌(如烟曲霉、黄曲霉、土曲霉、黑曲霉和构巢曲霉)，最低检测下线达到5～10CFU/ml，用于临床诊断侵袭性曲霉菌感染具有很好的敏感度和特异度。

主权项

1、一种检测曲霉菌荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒由引物、DNA聚合酶、荧光探针、荧光定量PCR反应液、定量阳性模板和阴性对照血清组成，其特征在于：(1)所述的引物为特异性扩增曲霉菌ITS I区域的引物，其中，上游引物序列为：5’-CGGAAGGATCATTACCGAGTGA-3’(SEQ NO.1)，下游引物序列为：5’-CCCGCCGAAGCAACAAG-3’(SEQ NO.2)；(2)所述的荧光探针序列为：5’FAM-CCAACCTCCCACCCGTGTCTATYGT-BHQ-1 3’(SEQ NO.3)，其中FAM为标记在探针5’端的荧光基团，BHQ-1为标记在探针3’端的荧光淬灭基团；(3)所述的定量阳性模板为含有序列为SEQ NO.4的DNA片段的pMD19-T重组质粒。