[发明专利]一种克隆野生稻新抗性基因的方法无效
| 申请号： | 200710034424.X | 申请日： | 2007-02-12 |
| 公开（公告）号： | CN101045928A | 公开（公告）日： | 2007-10-03 |
| 发明（设计）人： | 曹孟良;辜显旺;田志坚;李磊;邢俊杰;袁隆平;李强;崔玲玲;张朝良;金纬;李煊;孔洁洁 | 申请（专利权）人： | 湖南西城杂交水稻基因科技有限公司;长沙杂交水稻基因工程技术研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12Q1/68;C07H21/04 |
| 代理公司： | 长沙市融智专利事务所 | 代理人： | 颜昌伟 |
| 地址： | 410205湖南*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种克隆野生稻新抗性基因的方法，它包括首先构建供体野生稻可转化基因组文库，再根据已克隆抗稻瘟病基因及抗白叶枯基因的保守序列设计引物，获得扩增产物作为探针，然后使用已标记探针对文库进行磁珠富集，建立候选抗性基因富集文库，最后对富集文库的克隆进行点杂交分析、PCR鉴定、扩增产物的克隆测序分析及功能验证。本发明集成了候选抗性基因克隆技术和磁珠富集文库构建技术，适用于野生稻新抗性基因及其他植物有利基因的克隆。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 克隆 野生 抗性 基因 方法 | ||
【主权项】：
1、一种克隆野生稻新抗性基因的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)供体野生稻可转化基因组文库的构建；(2)根据植物抗性基因的保守性设计引物进行PCR扩增，用生物素标记扩增产物作为探针；(3)使用已标记探针对文库进行磁珠富集，构建富集文库；(4)对富集文库的克隆进行鉴定分析，包括使用上述引物进行PCR分析、点杂交分析、扩增产物克隆测序分析；(5)对利用富集文库筛选到的阳性克隆进行功能验证，筛选出野生稻新抗性基因。
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