[发明专利]快速分离日本血吸虫未成熟虫卵的方法

摘要

本发明公开了一种快速分离日本血吸虫未成熟虫卵的方法，采用反复过筛和加胰酶处理相结合的技术，整个分离过程在2小时内完成。所获虫卵纯度达99％以上，虫卵结构完整且保持了良好的生物活性，能满足抗原提取及分析等实验室研究的基本需要。与现有技术相比，虫卵收率也大幅度提高。

主权项

1、一种快速分离日本血吸虫未成熟虫卵的方法，其特征在于包括以下步骤：1)动物感染后32天处死，取肝脏并快速去除胆管、血管及结缔组织，将肝脏剪成碎块后倒入可调式高速匀浆器内，加水适量并以10000r/min快速捣碎3次，每次1分钟、间隔3分钟，得肝脏组织匀浆置于洁净器皿内。2)组织匀浆先后过80目、160目、260目、320目绢筛，收集320目绢筛内滤渣，加0.25％的胰酶在37℃下处理1h，每隔10min用吸管反复吸打混匀，处理后过260目绢筛除去较大的碎片，320目绢筛收集虫卵，用蒸馏水反复冲洗，尽量将其中肝组织碎片除去。3)在进行酶消化的同时收集80目、160目筛内残留物倒入可调高速匀浆器内再次捣碎，匀浆先后过80目、160目、260目、320目绢筛，收集各筛内滤渣并用0.5％的胰酶在37℃下处理1h，每隔10min用吸管反复吸打混匀，处理后过260目绢筛除去较大的碎片，320目绢筛收集虫卵。4)合并两次收集的虫卵，显微镜下检查纯度并保存于-70℃。