[发明专利]基因或核酸序列的酶切-连接长序列半合成方法无效
申请号: | 200710038807.4 | 申请日: | 2007-03-30 |
公开(公告)号: | CN101275163A | 公开(公告)日: | 2008-10-01 |
发明(设计)人: | 赫英俊;肖爱军;周磊;邵永胜 | 申请(专利权)人: | 上海捷瑞生物工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12P19/34;C07H21/04 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人: | 胡美强 |
地址: | 200233上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及基因或核酸序列的酶切-连接长序列半合成方法,是通过以下步骤实现的,目标基因或核酸序列分析:对要求合成或获得的目标序列进行分析,设计分段化学合成的片段长度、分割位点;目标基因或核酸序列的片段化学合成:根据上述分析的结果,用化学合成法合成目标基因或脱氧核糖核酸序列的片段,在合成时人为引入适当的限制性内切酶识别位点;目标基因或核酸序列各片段的限制性酶切反应:用能够识别上述位点的限制性内切酶进行酶切反应,产生含有粘性末端的片段;目标基因或核酸序列各片段的正确连接:用适当连接酶对分段合成的基因或核酸序列的片段进行常规的酶促连接反应;可获得10000个碱基对,最长达到13000碱基对;并且错误率低、成本也低。 | ||
搜索关键词: | 基因 核酸 序列 连接 合成 方法 | ||
【主权项】:
1. 一种基因或核酸序列的酶切-连接长序列半合成方法,是通过以下步骤实现的:目标基因或核酸序列分析:对要求合成或获得的目标序列进行分析,设计分段化学合成的片段长度、分割位点;目标基因或核酸序列的片段化学合成:根据上述分析的结果,用化学合成法合成目标基因或脱氧核糖核酸序列的片段,在合成时人为引入适当的限制性内切酶识别位点;目标基因或核酸序列各片段的限制性酶切反应:用能够识别上述位点的限制性内切酶进行酶切反应,产生含有粘性末端的片段;目标基因或核酸序列各片段的正确连接:用适当连接酶对分段合成的基因或核酸序列的片段进行常规的酶促连接反应。
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