[发明专利]一种抗人Nogo－66受体蛋白疫苗的制备方法及其应用无效
| 申请号： | 200710039666.8 | 申请日： | 2007-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN101288771A | 公开（公告）日： | 2008-10-22 |
| 发明（设计）人： | 陆佩华;于盼盼;黄立东;徐晓明;虞志华;王艳霞;王小飞;刘欣秋;徐亮 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学医学院 |
| 主分类号： | A61K39/395 | 分类号： | A61K39/395;A61P25/00;C12N15/09;C12N15/12 |
| 代理公司： | 上海翼胜专利商标事务所 | 代理人： | 翟羽 |
| 地址： | 200025上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种制备抗人Nogo－66受体蛋白疫苗的方法，从人神经母细胞瘤(SK－N－SH)cDNA中，经PCR扩增得到全长hNgR基因，将扩增的片段插入至克隆载体中，再亚克隆至含6个His标签的表达载体pET28a(+)获得重组表达质粒pET28a－NgR。将重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中进行诱导表达得到hNgR蛋白。抗NgR蛋白疫苗可以通过封闭NgR，阻断抑制因子的作用，从而促进脊髓损伤后神经元轴突的再生，减轻损伤区的组织坏死，促进损伤脊髓的功能恢复，表明NgR蛋白疫苗具有治疗脊髓损伤的潜在应用价值，其避免了外源性生物制剂，比较容易被自身免疫系统清除的缺点，另外也克服了针对NgR的DNA疫苗接种后主要诱发细胞免疫，只有少数个体能诱导出体液免疫的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 nogo 66 受体 蛋白 疫苗 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种抗人Nogo-66受体蛋白疫苗的制备方法，其步骤如下：从人神经母细胞瘤(SK-N-SH)cDNA中，经PCR扩增得到全长hNgR基因，不包含信号肽，所用引物如下：上游引物：5′-TTGGATCCTGCCCAGGTGCCTGCGTATG；下游引物：5′-TTAAGCTTCAGCAGGGCCCAAGCACTGTC；将扩增的片段插入至克隆载体pUC19中，经测序鉴定正确后再亚克隆至含6个His标签的表达载体pET28a(+)获得重组表达质粒pET28a-NgR；经酶切及测序鉴定正确后将重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中进行诱导表达。
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