[发明专利]一种香菇7402菌种AFLP快速检测方法无效
| 申请号： | 200710040320.X | 申请日： | 2007-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN101042370A | 公开（公告）日： | 2007-09-26 |
| 发明（设计）人： | 陈明杰;谭琦;尚晓冬;宋春艳;卓英;潘迎捷 | 申请（专利权）人： | 上海市农业科学院食用菌研究所 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海泰能知识产权代理事务所 | 代理人： | 黄志达;谢文凯 |
| 地址： | 201106*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开一种能简便、快速、准确地对香菇7402菌种进行鉴定的AFLP快速检测方法。方法包括步骤：菌丝培养和基因组DNA的提取；DNA的MseI和EcoRI双酶切；DNA片断使用MseI adapter与EcoRI adapter进行连接；DNA酶切产物的预扩增；AFLP的选择性扩增；遗传分析仪检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 香菇 7402 菌种 aflp 快速 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种香菇7402菌种AFLP快速检测方法，包括如下步骤：(1)菌丝培养和基因组DNA的提取(2)DNA双酶切对样品DNA进行MseI和EcoRI的双酶切；(3)DNA片断接头的连接接头使用MseI adapter与EcoRI adapter；(4)DNA酶切产物的预扩增预扩增的专用引物，是根据MseI和EcoRI酶切位点而设计的，序列分别为：E00：GAC TGC GTA CCA ATT CM00：GAT GAG TCC TGA GTA A(5)AFLP的选择性扩增预扩增产物稀释20倍，作为选择性扩增的模板。选择性扩增的引物Mse1 11和EcoRI14是在引物M00和E00基础上设计的序列如下：EcoRI 14：GAC TGC GTA CCA ATT CATMse1 11：GAT GAG TCC TGA GTA ACA(6)遗传分析仪检测选择性扩增的AFLP产物在遗传分析仪器进行毛细管电泳检测。
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