[发明专利]一种抗体亲和层析纯化溶葡萄球菌酶的方法有效
| 申请号： | 200710040561.4 | 申请日： | 2007-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN101302504A | 公开（公告）日： | 2008-11-12 |
| 发明（设计）人： | 黄晋江;张继恩;黄青山 | 申请（专利权）人： | 上海高科联合生物技术研发有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/36 | 分类号： | C12N9/36 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所 | 代理人： | 余明伟 |
| 地址： | 201206上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种抗体亲和层析纯化溶葡萄球菌酶的方法，包括如下步骤：(1)将含有溶葡萄球菌酶抗体样品通过用缓冲液A平衡好的装有protein A树脂的层析柱，清洗，洗脱，收集洗脱峰冻干；(2)将冻干产物与亲和层析介质混合，制得免疫亲和层析介质；(3)将溶葡萄球菌酶样品通过预先用缓冲液A平衡好的装有免疫亲和层析介质的层析柱；然后用缓冲液A清洗上样后的免疫亲和层析柱；再用缓冲液C将溶葡萄球菌酶从层析柱上洗脱，收集洗脱峰。本发明的方法，活性蛋白回收率为85～95％，比活性大于1000U/mg，蛋白纯化倍数为3－5以上，纯度可达到95－98％，处理速度快、回收率高及重复性好、柱效长且结合效率基本不变。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抗体 亲和 层析 纯化 葡萄球菌 方法 | ||
【主权项】：
1.一种抗体亲和层析纯化溶葡萄球菌酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)溶葡萄球菌酶抗体的处理：将含有溶葡萄球菌酶抗体的样品通过预先用缓冲液A平衡好的装有protein A树脂的层析柱，然后用缓冲液A清洗上样后的protein A层析柱；再用pH2.0～4.0的缓冲液B将溶葡萄球菌酶抗体从层析柱上洗脱，并收集洗脱峰，冻干；(2)免疫亲和层析介质的制备将步骤(1)收集的冻干产物与亲和层析介质混合，偶联反应，制得免疫亲和层析介质；(3)溶葡萄球菌酶用免疫亲和层析介质进行纯化将溶葡萄球菌酶样品通过预先用缓冲液A平衡好的装有步骤(2)的免疫亲和层析介质的层析柱；然后用缓冲液A清洗上样后的免疫亲和层析柱；再用pH2.5～4.5的缓冲液C将溶葡萄球菌酶从层析柱上洗脱，并收集洗脱峰。
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