[发明专利]胚胎源性多能干细胞向心脏起搏细胞定向诱导分化的方法有效
| 申请号： | 200710042044.0 | 申请日： | 2007-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN101100655A | 公开（公告）日： | 2008-01-09 |
| 发明（设计）人： | 张喜;张传森 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第二军医大学 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06;C12N5/08 |
| 代理公司： | 上海德昭知识产权代理有限公司 | 代理人： | 丁振英 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及干细胞诱导分化技术领域。目前构建生物心脏起搏器的细胞移植方法主要是以胚胎源性干/祖细胞和成体间充质干细胞作为细胞来源。本发明利用胚胎源性多能干细胞定向诱导分化心脏起搏细胞，采用全骨髓直接贴壁法获得原代培养的细胞，按有限稀释法进行克隆培养获得该细胞的纯化系，通过施加旁分泌因子内皮素-1或神经调节蛋白-1，胞外基质组分层粘连蛋白、纤维连接蛋白等基质胶；同时转染转起搏基因HCN4的方法体外诱导胚胎源性多能干细胞向起搏细胞方向分化。本发明提供一种供给广泛、无免疫原性、不涉及伦理学问题的起搏细胞来源，为临床治疗病态窦房结综合症等缓慢性心率失常带来希望。 | ||
| 搜索关键词： | 胚胎 多能 干细胞 心脏 起搏 细胞 定向 诱导 分化 方法 | ||
【主权项】：
1、一种胚胎源性多能干细胞向心脏起搏细胞定向诱导分化的方法，其特征在于该方法包括：I.胚胎源性多能干细胞的分离、培养、鉴定采用全骨髓直接贴壁法获得原代培养的细胞，然后按有限稀释法进行克隆培养获得该细胞的纯化系，通过对CD133、SSEA-1、CD45、Oct-4和Nanog标记物的检测进行鉴定；II.胚胎源性多能干细胞向心脏起博细胞的诱导分化向胚胎源性多能干细胞施加旁分泌因子、胞外基质组分层粘连蛋白、纤维连接蛋白，诱导胚胎源性多能干细胞分化为心脏起搏细胞。
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