[发明专利]从发酵液中提取L－谷氨酰胺粗结晶的方法

摘要

本发明涉及一种从发酵液中提取L－谷氨酰胺粗结晶的方法，属发酵工程中分离提取技术领域。本发明方法具有以下工艺步骤：①制备发酵液，首先配制L－谷氨酰胺发酵培养基，将培养基加入至发酵罐中，在115℃下加热灭菌15分钟，然后冷却至31.5℃，接种黄色短杆菌ATCC14067变异菌株进行发酵；②将上述发酵液加热升温至80℃，放出发酵液，静置于另一容器中，菌体沉降，形成清液和菌体沉降液两部分，各别进行减压过滤，合并两部分滤液，得澄清的发酵液；③将澄清的发酵液在旋转式真空蒸发器中进行浓缩，采用水浴55～60℃加热，浓缩至1/5体积；④在室温下搅拌，然后放在4℃冰箱中5～10小时继续进行低温冷却结晶；⑤取出冰箱后，抽滤，乙醇洗涤，再抽干，得湿结晶；⑥将湿结晶在50℃下减压烘干，得浅黄色粗制结晶。

主权项

1.一种从发酵液中提取L-谷氨酰胺粗结晶的方法，其特征在于具有以下的工艺过程和步骤：a.制备发酵液：首先配制L-谷氨酰胺发酵培养基，该培养基的组成及其重量百分配比如下：葡萄糖12％，氯化铵2％，磷酸氢二钾0.05％，磷酸二氢钾0.05％，硫酸镁0.04％，玉米浆1～1.2％，余量为水；用氢氧化钠溶液调节培养基的初始pH值为6.5；将所述的培养基加入至发酵罐中，在115℃下加热灭菌15分钟，然后冷却至31.5℃，接种黄色短杆菌ATCC14067变异菌株进行发酵；发酵过程中通过添加浓氨水的方法来补充氮源并控制发酵液的pH值；当发酵液中葡萄糖含量降至2％以下时，补充糖分1～2次，每次补糖量为1～2％；当发酵液中葡萄糖含量降至0.5％以下时，发酵结束；b.将上述发酵罐内的发酵液加热升温至80℃，随后即放出发酵液，静置于另一容器中，菌体逐渐凝聚并自然沉降，形成清液和菌体沉降液两部分；先吸出上部的清液部分，随后向下部的菌体沉降液部分添加入1％的硅藻土；然后将清液和菌体沉降液两部分分别进行减压过滤；合并两部分过滤出的液体，得到澄清的发酵液；c.将上述澄清的发酵液用旋转式真空蒸发器进行真空浓缩，并采用水浴加热，水浴温度为55～60℃，控制发酵液处于沸腾状态，并浓缩至原体积的1/5左右；d.然后将旋转蒸发器中浓缩液转移到另外容器中，在室温下搅拌至结晶不再增多；然后放在4℃冰箱中5～10小时继续进行低温冷却结晶；e.从冰箱中取出含有结晶的悬浮液，进行抽滤，直至无母液流出为止；用少量50％乙醇溶液淋洗结晶，再次抽干，得到湿结晶；f.将上述所得的湿结晶在50℃下减压烘干，得到浅黄色的粗制结晶，其L-谷氨酰胺含量65％以上；该粗结晶可供进一步精制纯化。