[发明专利]化学发光物质吖啶酯DMAE·NHS的合成方法

摘要

本发明涉及一种化学发光物质吖啶酯DMAE·NHS的合成方法。本发明方法分七步合成所需要的产品，每步合成的产物都经IR、¹HNMR、MS和元素分析表征。使用氢氧化钾作反应物成功合成3，5－二甲基－4－羟基苯甲酸钾，本发明方法是将粗产品经过第一次柱层析后，加入己烷/丙酮(2∶1，V∶V)进行研磨，过滤，分离出沉淀，用己烷/丙酮(2∶1，V∶V)洗涤，除去溶于己烷/丙酮(2∶1，V∶V)的杂质，干燥后得所需要的产品。

主权项

1.一种化学发光物质吖啶酯DMAE·NHS的合成方法，其特征在于该方法具有如下步骤：a.3，5-二甲基-4-羟基苯甲酸钾的合成：将3，5-二甲基-4-羟基苯甲酸溶于甲醇中，搅拌下，滴加KOH溶液以调节溶液pH为7，在室温下搅拌反应3±0.5小时，减压蒸馏除去溶剂，加入丙酮研磨，过滤并用丙酮洗涤，真空干燥后得白色固体即为3，5-二甲基-4-羟基苯甲酸钾；b.3，5-二甲基-4-羟基苯甲酸苄酯的合成：将步骤a制备的3，5-二甲基-4-羟基苯甲酸钾、二苯并-18-冠醚-6溶于DMF和乙腈按1∶2体积比的混合溶剂中，搅拌下回流反应30±5分钟，再加入苄氯，继续反应3.5±0.5小时，冷却至室温，过滤，减压蒸馏除去溶剂，用少量氯仿溶解提取，将提取液上硅胶柱进行柱层析纯化，首先用体积比为3∶1的氯仿与己烷的混合液淋洗，然后用氯仿淋洗，分部接收，分别点样于硅胶板上进行薄板层析，展开剂为体积比为4∶1的甲苯与乙酸乙酯的混合液，收集对应Rf＝0.6的部分，蒸发、干燥后得白色固体，即为3，5-二甲基-4-羟基苯甲酸苄酯；其中3，5-二甲基-4-羟基苯甲酸盐、二苯并-18-冠醚-6与苄氯的摩尔比为：8.00～9.00∶1∶12.00～13.00；c.9-吖啶酰氯的合成：将9-吖啶羧酸溶于亚硫酰氯中，加热到100±5℃，搅拌反应2±0.5小时，冷却至室温，减压蒸馏除去过剩的亚硫酰氯，真空干燥后得黄色固体，即为9-吖啶酰氯；d.2’，6’-二甲基-4’-苄氧羰基苯基-吖啶-9-羧酸酯的合成：将上述制备的3，5-二甲基-4-羟基苯甲酸苄酯和4-二甲基氨基吡啶溶于吡啶中，100±5℃温度下，加热搅拌反应30±5分钟，冷却至室温，加入9-吖啶酰氯，100±5℃下搅拌反应3±0.5小时，然后在室温下搅拌反应过夜，减压蒸馏除去溶剂，粗产品用少量氯仿提取后上硅胶柱进行柱层析纯化，先用氯仿，后用乙酸乙酯淋洗，分部接收，点样于硅胶板上进行薄板层析，展开剂为体积比为4∶1的甲苯与乙酸乙酯的混合液，收集Rf＝0.6部分，蒸发，真空干燥，再用乙酸乙酯和己烷进行重结晶，真空干燥后得针状黄色固体，即为2’，6’-二甲基-4’-苄氧羰基苯基-吖啶-9-羧酸酯；其中反应物3，5-二甲基-4-羟基苯甲酸苄酯、4-二甲基氨基吡啶与9-吖啶酰氯的摩尔比为6.00～7.00∶1∶8.00～9.00；e.2’，6’-二甲基-4’-甲酸苯基-吖啶-9-羧酸酯的合成：将上述制备的2’，6’-二甲基-4’-苄氧羰基苯基-吖啶-9-羧酸酯、冰醋酸、体积百分比浓度为40％氢溴酸，加热至100±5℃，搅拌反应3±0.5小时，冷却至室温，加入水，用体积比为1∶4的甲醇与氯仿的混合液进行萃取，收集有机相，蒸干，用己烷洗涤，加入氯仿得黄色悬浊液，缓慢滴加三乙胺中和至溶液的PH为7，水洗，无水硫酸钠干燥，蒸发，真空干燥后得粗产品，将粗产品在硅胶板上进行薄板层析，展开剂为体积比1∶9的甲醇和氯仿的混合液，收集Rf＝0.42的部分，即得到2’，6’-二甲基-4’-甲酸苯基-吖啶-9-羧酸酯；其中2’，6’-二甲基-4’-苄氧羰基苯基-吖啶-9-羧酸酯、冰醋酸和氢溴酸的摩尔比为：1∶242.0～243.0∶11.00～12.00；f.2’，6’-二甲基-4’-(N-琥珀酰亚胺氧羰基)苯基-吖啶-9-羧酸酯的合成：将上述制备的2’，6’-二甲基-4’-甲酸苯基-吖啶-9-羧酸酯溶于二甲基甲酰胺中，冰浴下加入浓度为60g/L的二环己基碳二亚胺的DMF溶液和浓度为33.8g/L的N-羟基琥珀酰亚胺的DMF溶液，室温下搅拌反应过夜，减压蒸馏除去溶剂，用二氯甲烷萃取，过滤，滤液浓缩，加入乙酸乙酯研磨，过滤，乙酸乙酯洗涤，真空干燥得粗产品，粗产品用体积比为4∶1的氯仿和乙酸乙酯的混合液溶解，经硅胶柱层析纯化，淋洗液为体积比为4∶1的氯仿和乙酸乙酯的混合液，分部收集，点样于硅胶板上进行薄板层析，展开剂为体积比为4∶1的乙醚和乙酸乙酯的混合液，收集Rf＝0.88部分，蒸发，真空干燥，得白色固体；在该白色固体中加入体积比为2∶1的己烷和丙酮混合液研磨，过滤，再用体积比为2∶1的己烷和丙酮混合液洗涤，真空干燥后得白色固体，即为2’，6’-二甲基-4’-(N-琥珀酰亚胺氧羰基)苯基-吖啶-9-羧酸酯；其中2’，6’-二甲基-4’-甲酸苯基-吖啶-9-羧酸酯、二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为：1∶1.000～2.000∶1.000～2.000；g.2’，6’-二甲基-4’-(N-琥珀酰亚胺氧羰基)苯基-10-甲基-吖啶-9-羧酸酯甲磺酸盐的合成：将2’，6’-二甲基-4’-(N-琥珀酰亚胺氧羰基)苯基-吖啶-9-羧酸酯溶于二氯甲烷中，再加入硫酸二甲酯，加热回流反应四天四夜，冷却至室温，滴加无水乙醚，析出黄色沉淀，至沉淀完全析出，过滤，真空干燥，用二氯甲烷和乙醚重结晶，真空干燥得黄色固体，即为2’，6’-二甲基-4’-(N-琥珀酰亚胺氧羰基)苯基-10-甲基-吖啶-9-羧酸酯甲磺酸盐。