[发明专利]基于Phi BT1整合酶及Phi C31整合酶的基因克隆质粒及其应用无效
| 申请号： | 200710046172.2 | 申请日： | 2007-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN101157934A | 公开（公告）日： | 2008-04-09 |
| 发明（设计）人： | 陈金中;李智慧;姚纪花;田聆;薛京伦 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/66 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物技术和基因工程技术领域，具体涉及一种基于Phi BT1整合酶及Phi C31整合酶的基因克隆质粒(pBCFX+和pBCFX－)及其应用。该质粒使用含有Phi BT1整合酶及PhiC31整合酶对应attP位点串连序列的中间插入LacZ表达框架作为质粒载体(pBCFX+和pBCFX－)置换克隆位点，采用插入失活作蓝白筛选。基于该质粒的克隆方法主要包括使用PhiBT1整合酶及Phi C31整合酶混合物作为定点整合催化酶，插入DNA片段依据目的要求可以通过PCR等技术在两侧附加对应的attB序列，从而决定插入片段方向性。该克隆体系可以方便操作含有特别内切酶位点的插入DNA，在大片段基因操作方面有独到优势，因为该体系不需要限制性酶，磷酸酶和连接酶操作，可以简化重组DNA操作方法。在基因工程中有广泛应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 phi bt1 整合 c31 基因 克隆 质粒 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种含Phi BT1整合酶和Phi C31整合酶对应att克隆位点的质粒，包括pBCFX+和pBCFX-，前者序列为SEQ №3，后者序列为SEQ №4。
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