[发明专利]可表达和分泌β－半乳糖苷酶的大肠杆菌－乳酸菌穿梭质粒及其构建方法与应用无效
| 申请号： | 200710048430.0 | 申请日： | 2007-02-08 |
| 公开（公告）号： | CN101033471A | 公开（公告）日： | 2007-09-12 |
| 发明（设计）人： | 汪川;张朝武;刘衡川;余倩;许欣;裴晓方;王国庆;林怡伶 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/56;C12N1/21 |
| 代理公司： | 成都科海专利事务有限责任公司 | 代理人： | 黄幼陵 |
| 地址： | 610065四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 一种可表达和分泌β－半乳糖苷酶的大肠杆菌－乳酸菌穿梭质粒，所含基因由编码β－半乳糖苷酶的基因及该基因上游含SD位点的调控序列组成。实验证明，上述重组质粒可转化乳酸乳球菌，在大肠杆菌和乳酸乳球菌中高效表达非融合β－半乳糖苷酶，在β－半乳糖苷酶制备和构建可表达β－半乳糖苷酶的乳酸菌株中应用。构建方法包括以下步骤：以德氏乳杆菌保加利亚亚种基因组DNA为模板，扩增得到含上游调控序列的β－半乳糖苷酶基因；将上述扩增得到的β－半乳糖苷酶基因双酶切后与用同种酶双酶切并去磷酸化的载体连接并转化感受态大肠杆菌；筛选阳性大肠杆菌，提取阳性大肠杆菌中重组质粒酶切鉴定并对插入序列进行测序。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 分泌 半乳糖 大肠杆菌 乳酸菌 穿梭 质粒 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1、一种可表达和分泌β-半乳糖苷酶的大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒，其特征在于所含基因由编码β-半乳糖苷酶的基因及该基因上游含SD位点的调控序列组成，为序列表中SEQ ID NO.3所述的核苷酸序列。
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