[发明专利]快速测定铜蓝蛋白的免疫共振散射光谱法

摘要

本发明公开了一种简便、快速测定铜蓝蛋白免疫共振散射光谱法，主要是在37℃水浴条件下，利用羊抗人铜蓝蛋白和铜蓝蛋白在PEG条件下，发生特异性免疫结合反应，生成免疫复合物微粒，此复合物微粒存在共振散射，铜蓝蛋白在一定浓度范围内，其浓度与共振散射强度是线性关系，据此建立起了快速测定铜蓝蛋白新方法。本发明的优点是：与已有的方法相比，本测定方法的仪器简单，操作简便，灵敏度高，选择性好，反应条件容易达到；本法羊抗人CER试剂用量少，成本低廉。

主权项

1.一种快速测定铜蓝蛋白的免疫共振散射光谱法，其特征是：测定方法包括如下步骤：(1)制备已知CER浓度的测试体系：依次移取0.30mL pH值为6.4的磷酸盐缓冲溶液，0.20mL稀释25倍的羊抗人CER溶液，一定量10.8μg/mL的CER溶液，0.50mL质量浓度为15％的PEG-6000溶液于5mL带刻度的试管中，用二次蒸馏水定容至2.0mL，混匀，在37℃水浴锅中温育15min；(2)用步骤(1)的方法不加CER制备空白对照体系；(3)分别取上述体系于石英池中，在荧光分光光度计上在激发波长λex等于发射波长λem(λex＝λem)，激发和发射狭缝均为5.0nm，测定电压为450V的条件下同步扫描，得到体系的共振散射光谱，测定490nm处的散射强度IRS，试剂空白为I0，计算ΔIRS＝IRS-I0；(4)以ΔIRS对CER的浓度关系作工作曲线；(5)依照步骤(1)的方法制备检测体系，其中加入的CER为含有CER但未知浓度的被测物，求出被测物的ΔIRS；(6)依据(4)的工作曲线，计算出被测物的CER的浓度。