[发明专利]一种基于稳定性同位素指纹图谱鉴别道地中药材的方法

摘要

一种基于稳定性同位素指纹图谱鉴别道地中药材的方法，具体方法步骤如是：1.首先测定道地中药材稳定性氮同位素组成和比值；2.其次测定道地中药材稳定性氢同位素组成和比值；3.稳定性同位素指纹图谱构建；4.道地中药材的甄别。通过该方法对鉴别道地中药材的质量、产地和搀假现象具有快速、准确、有效等优点，有很好的推广实用价值。

主权项

1、一种基于稳定性同位素指纹图谱鉴别道地中药材的方法，其特征是，具体方法步骤如下：一、首先测定道地中药材稳定性氮同位素组成和比值，具体步骤是：①、取样：将道地中药材每个样地每个种先要从5—10个单株上分别取样，然后合而为一，形成该种的一个样品，所取样品为道地中药材的主要要用器官或组织(如充分展开的叶片、成熟枝茎或根状茎)。②、样品的制备：(1)将所取样品烘干、粉碎与称量待测样品放入通风干燥器内，在70℃以下烘干48h，然后将叶片不包括叶柄，叶轴用粉碎机粉碎过0.5mm的筛，装入密闭容器(小塑料瓶或密封塑料袋)备用。(2)将样品转化为气态N2：将所测样品装入材料管，加入CuO(短细线状)和铜(细颗粒状)各1g，以及一小片银作催化剂，密封材料管，放入炉内燃烧，一般在520℃下燃烧34h，燃烧后管内的材料被分解成N2。③、质谱仪测定：产生的纯气体N2最终收集在测试管中，便可在质谱仪上进行同位素测定。通常，质谱仪在计算机辅助下直接给出同位素比值。二、其次测定道地中药材稳定性氢同位素组成和比值，具体步骤是：①、取样：将道地中药材的植物组织，尽快冷冻并冻干，或在中等温度下快速干燥，然后研磨至通过40目筛。在分析D/H比率之前，有机物的样品需经过硝化处理，去除可能与环境交换的氢原子。②、样品的气化、纯化和分离：将测量材料装入材料管，加入催化剂1g氧化铜、1g铜和一小片银。将材料管与真空系统连接，抽到真空后封管，然后放入炉内燃烧。燃烧后的材料管内混杂有各种气体，须在特制的系统中分离，使所需的气体纯化，然后收集入测试管。③、质谱仪测定分析：产生的纯气体H2最终收集在测试管中，便可在质谱仪上进行同位素测定。通常，质谱仪在计算机辅助下也直接给出同位素比值。三、稳定性同位素指纹图谱构建：通过所测道地中药材稳定性氮和氢同位素的比值，即可在二维坐标上构建其特征性的坐标点，进而为道地中药材建立稳定同位素的指纹图谱，为准确和及时地检测道地中药材的质量、产地和搀假现象提供一种新型的技术方法和手段。四、道地中药材的甄别：由于道地中药材的稳定性同位素组成具有特异性，通过对待测道地中药材样品的稳定性氮和氢同位素的测定，在已知稳定性同位素标准指纹图谱上进行比对，若测定指标落入对应道地中药材的坐标点范围内，则可认定其为道地中药材。反之，若测定的坐标点逃逸出上图道地中药材的坐标范围，则认定其为非道地中药材，或进行了搀假。依次原理，可进行其他道地中药材的鉴别和标准制定。