[发明专利]一种鸡球虫疫苗的制备方法

摘要

本发明涉及一种鸡球虫疫苗的制备方法，其特征在于：具体的步骤为首先进行卵囊孢子化，扩增鸡球虫卵囊，将分离出的卵囊放入置重铬酸钾溶液的培养皿中，当有90％以上的卵囊完成孢子化时，停止培养，置于4℃冰箱储存备用；其次进行超声波致弱卵囊，将以上收集的孢子化卵囊加蒸馏水离心除去重铬酸钾溶液后，置于100ml小烧杯中，计数后再将小烧杯放入装有碎冰块的1000ml大烧杯进行冰浴后，置于超声波仪进行致弱。其使用安全、操作简便、效果好的鸡球虫超声波致弱方法。

主权项

1、一种鸡球虫疫苗的制备方法，其特征在于：是采用超声波致弱的方法，其具体的步骤为：(1)首先进行卵囊孢子化，扩增鸡球虫卵囊，将分离出的卵囊放入置有10倍体积的2.5％的重铬酸钾溶液的培养皿中，溶液深度约0.6cm，放入温度为28～30℃恒温箱中，培养5天；培养期间每天对培养液轻轻搅拌4～5次，当有90％以上的卵囊完成孢子化时，停止培养，置于4℃冰箱储存备用；(2)其次进行超声波致弱卵囊，将以上收集的孢子化卵囊加蒸馏水3000-5000转/分离心2-3次除去重铬酸钾溶液后，置于100ml小烧杯中，计数后再将小烧杯放入装有碎冰块的1000ml大烧杯进行冰浴后，置于超声波仪隔音箱升降台上，使升降台上升至变幅杆浸入溶液10mm后，将功率调至最小位置200瓦，调整好超声时间为3秒，调整间隙时间为3秒进行致弱，超声时间为8-12分钟。(3)超声结束后，如若不立即使用，将100ml球虫卵囊液加入2％重铬酸钾溶液100ml，1％叠氮钠溶液1.5ml，放置4℃冰箱备用；使用前将球虫卵囊溶液加10倍体积的蒸馏水，以4000转/分离心3次，每次3分钟，以除去重铬酸钾、叠氮钠溶液后制成口服疫苗。